廣西部分地區(qū)商業(yè)肉鴨群鴨疫里默氏桿菌病的研究.pdf

1、鴨疫里默氏桿菌(Riemerella anatipestifer，RA)病是目前危害養(yǎng)鴨業(yè)最為嚴重的疾病之一，主要侵害1～7周齡雛鴨，呈急性或慢性敗血癥，其主要病理特征是纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎。該病由于高死亡率、增重緩慢給養(yǎng)鴨業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。因此，在廣西對該病進行全面的研究，對于該病的有效防制是十分必要的。 課題對廣西的南寧、容縣、欽州三個地區(qū)不同日齡的29個商業(yè)肉鴨群共184羽有漿膜炎病變的?。励嗊M行RA的分

2、離與鑒定。分離株在燭缸培育的巧克力培養(yǎng)基上長成圓形、稍突起、表面光滑、透明，直徑0.5～2mm的菌落，而在麥康凱平板上不生長；革蘭氏染色后鏡檢可見呈革蘭氏陰性的短小桿菌，單個、成雙或呈鏈狀，瑞氏染色顯示兩極濃染；經(jīng)生化反應(yīng)的鑒定，結(jié)果有82個分離菌株的生化鑒定結(jié)果與RA參考菌株NN050021①的基本一致；分別應(yīng)用血清2型和血清6型的RA參考菌株制備的陽性血清對分離菌株進行玻片凝集試驗，結(jié)果82個分離菌株均與RA血清2型的陽性血清呈陽性

3、反應(yīng)；應(yīng)用聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)對分離株的42kD外膜蛋白基因進行擴增，結(jié)果所有分離菌株均能擴增到與RA參考株一樣的一條809bp大小的特異片段，而鴨源的大腸桿菌和鴨源的多殺性巴氏桿菌均未能擴增到相應(yīng)片段；隨機選取24個RA分離株進行12種常用藥物的敏感性試驗，結(jié)果表明大多數(shù)分離株對頭孢唑啉、頭孢啦啶、頭孢哌酮表現(xiàn)高度敏感，而對恩諾沙星、洛美沙星、環(huán)丙沙星、強力霉素、卡那霉素表現(xiàn)有抗

4、藥性；同時對RA陽性病料進行大腸桿菌(E.coli)的分離。 通過12日齡鴨胚尿囊腔和10日齡雞胚尿囊腔的途徑按4:1、l:1菌量同時接種RA和E．coli分離株的種子液，分別收集接種后48h內(nèi)死亡的鴨胚和雞胚的尿囊液、尿囊膜和胚體并制成勻漿混合液，經(jīng)福爾馬林滅活后按常規(guī)方法與礦物油分別制備成了油包水的二聯(lián)油乳劑滅活疫苗Ⅰ和Ⅱ，并進行了實驗室免疫保護試驗、田間免疫攻毒試驗和田間小規(guī)模免疫應(yīng)用效果的觀察。5組每組各12羽的

5、櫻桃谷肉鴨，5日齡時1、2、3、4組頸部皮下接種疫苗Ⅰ (1羽份)，5組則接種生理鹽水。20天后取1、2、3和5組分別用同源的RA(5×10<'8>個CFU)、E.coli(5×10<'7>個CFU和相同菌量的RA和E.coli混合菌液進行腹腔內(nèi)接種攻毒，結(jié)果各組的保護率分別為83.3[％]、83.3[％]、75[％]和O[％]；4組12日齡時再用該二聯(lián)苗1羽份進行二免，免疫后(post-immunization，PI)20天以相同菌量

6、的RA和E.coli混合菌液進行腹腔內(nèi)接種攻毒，保護率為100[％]；田間2群4 000羽櫻桃谷肉鴨5日齡頸部皮下接種疫苗I(1羽份)，至25日齡、42日齡為止，經(jīng)觀察統(tǒng)計，對RA和E.coli自然感染的保護率分別為98.4[％]、100[％]和100[％]、98[％]；田間5 800羽櫻桃谷肉鴨8曰齡時頸部皮下接種疫苗Ⅱ(1羽份)，分別在PI 10天、20天、30天、40天共4次隨機各抽取15羽免疫鴨，每次分成A、B、C三組，每組5羽

7、，分別用同源的RA(5×10<,8>個CFU)、E.coli(5×10<'7>個CFU)和相同菌量的RA和E.coli混合菌液進行腹腔內(nèi)接種攻毒，結(jié)果各次的保護率分別為O[％]、60[％]、20[％]，60[％]、100[％]、40[％]，80[％]、100[％]、80[％]，80[％]、100[％]、80[％]。 研究結(jié)果證明，在廣西部分地區(qū)的商業(yè)肉鴨群中血清2型RA的感染較為普遍，而且常常與E.coli混合感染；以鴨胚來作