慢性乙型肝炎患者血液流變學與樹突狀細胞的研究.pdf

1、目的：觀察慢性乙型肝炎患者血液流變學狀態(tài)和外周血單個核細胞來源的樹突狀細胞數(shù)量及表型的變化，分析血液流變學指標和樹突狀細胞之間的關系，以揭示二者在慢性乙型肝炎發(fā)生和發(fā)展過程中的作用，更好的指導臨床治療。 對象與方法：健康對照組21例，年齡19-48歲，平均(34.6±4.9)歲，其中男性12例女性9例，均為身體健康者。37例慢性乙肝患者，為2005年5-8月在山東大學齊魯醫(yī)院肝病門診就診患者。年齡18-61歲，平均(36.5±

2、5.2)歲。其中男性23例女性14例，均符合2000年9月西安全國第十次病毒性肝炎及肝病學術會議修訂的病毒性肝炎診斷標準。所選患者均排除了合并其它病毒感染且未有其他系統(tǒng)疾病，半年內(nèi)未用過免疫調(diào)節(jié)劑。取空腹靜脈血20ml，其中5ml采用北京世帝儀器公司生產(chǎn)的R-80血液粘度儀進行血液流變學指標的測定，另15ml靜脈血以PBS對倍稀釋后，用人淋巴細胞分離液分離出PBMC，將獲取的：PBMC用RPMI 1640培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為1×10<'

3、7>/L鋪入六孔培養(yǎng)板，置于37℃、5％CO<,2>培養(yǎng)箱中孵育2小時后吸棄未貼壁細胞。在貼壁細胞中加入適當濃度的GM—CSF和IL-4繼續(xù)培養(yǎng)，每天觀察細胞形態(tài)的變化，隔日半量換液，第五天時加入TNF-a，第七天收懸浮細胞，計數(shù)，單抗標記DC上流式細胞儀測定CD83、CD86的表達水平，并取部分細胞用3％戊二醛固定后送電鏡室制備成透射電鏡標本，觀察DC的超微結構。應用t檢驗分析慢性乙肝組與正常對照組之間各指標的差異，用直線相關分析分析

4、血液流變學指標與DC數(shù)量和表型之間的關系。結果： 1．血液流變學指標的比較：與正常對照組比較，慢性乙肝組全血低切粘度明顯升高(P<0.05)，血漿粘度、紅細胞聚集指數(shù)均有明顯升高(P<0.05)。 2．單個核細胞誘導的DC數(shù)量及表型的比較：與正常對照組比較，慢性乙肝組誘導出的DC數(shù)量及共刺激分子CD83、CD86的表達均明顯降低 (P<0.05)。 3．DC形態(tài)的觀察：培養(yǎng)第七天時，正常人的DC體積較

5、前明顯增大，形狀不規(guī)則，邊緣出現(xiàn)多個大小不等的毛刺，呈典型的成熟DC的形態(tài)，而慢性乙型肝炎患者的DC在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的集落較小，體積比正常人的DC稍小，突起亦較少。 4．直線相關分析血液流變學指標與DC數(shù)量、表型的關系：慢性乙型肝炎患者各血液流變學指標與DC數(shù)量、DC表面分子CD83、CD86之間無明顯相關關系。 結論： 1．在慢性乙型肝炎患者體內(nèi)存在血液流變學狀態(tài)改變和微循環(huán)障礙，在進行常規(guī)治療的同時予以活血