細胞膜水通道蛋白Aquaporin-1與缺血后心肌水轉(zhuǎn)運及心肌血管生成的關(guān)系.pdf

1、目的：1．在動物心肌缺血模型中觀察心肌aquaportin-1(AQP1)蛋白在心肌組織中的表達規(guī)律及缺血后水通道AQP1 mRNA及蛋白在心肌組織中表達變化。 2．探討AQP1蛋白的水跨膜轉(zhuǎn)運功能與缺血后心肌水腫的關(guān)系。 3．初步探討AQP1蛋白與缺血后心肌血管生成及組織修復(fù)的關(guān)系。 方法：建立兔心肌缺血模型。設(shè)假手術(shù)組為實驗?zāi)Ｐ蛯φ战M。設(shè)經(jīng)乙酰唑胺處理的假手術(shù)組及缺血模型組為干預(yù)對照組(設(shè)不同劑量組，分組詳見

2、第一部分的材料和方法部分)。在設(shè)定的時間點收獲實驗動物的心肌組織標本。以抗AQP1特異性免疫組化考查AQPl在心肌中組織分布特點；以Real-time PCR及Westem blotting了解在缺血狀態(tài)下心肌組織AQP1基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達的動態(tài)變化趨勢；采用Evan’blue定量測定法了解缺血心肌組織中毛細血管通透性的變化及用心肌水含量測定法了解缺血心肌的水腫程度；對心肌標本行CD31特異性免疫組化染色，進行毛細胞血管密度以了解心肌血

3、管生成的活躍程度。結(jié)合心肌Evan’blue及TTC染色了解缺血心肌梗塞面積/缺血面積(I/R)的比值。 結(jié)果：1．AQP1在心肌中分布廣泛，并且主要分布于心肌血管及心肌細胞膜。缺血造成AQP1在心梗邊緣區(qū)心肌的mRNA及蛋白表達呈現(xiàn)增高的趨勢。乙酰唑胺對模型動物的處理造成AQP1蛋白表達的下降但是對AQP1 mRNA沒有明顯的影響。 2．缺血后心肌迅速出現(xiàn)組織水腫，乙酰唑胺干預(yù)可以抑制心肌水腫的程度。在一定時間范圍內(nèi)心

4、肌水腫的程度與AQP1蛋白的表達量相關(guān)。 3．心肌缺血后心梗邊緣毛細血管密度出現(xiàn)升高，乙酰唑胺處理的缺血組毛細血管密度出現(xiàn)下降，同時伴隨著I/R比值的下降。心肌缺血后AQP1蛋白的表達量與缺血心肌中毛細血管密度有關(guān)，同時，AQP1蛋白含量與組織修復(fù)程度有關(guān)。 結(jié)論：兔心肌組織各房室皆在著．AQP1蛋白的表達，組織定位主要位于血管內(nèi)皮細胞及心肌細胞上。心肌缺血造成AQP1基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達一過性增高。乙酰唑胺的處理不影響A