心肌缺血晚期再灌注后心肌損傷及其與NF-κB的關系.pdf

1、目的 研究表明，心肌梗死(myocardial infarction，MI)后晚期開通梗死相關血管仍然有利于改善心肌重構，保護心功能。最近，我們的研究顯示，超過一定時間的缺血再灌注仍然存在氧化應激、梗死周邊區(qū)細胞凋亡增加等現(xiàn)象，提示存在晚期缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury，IRI)。既往的研究表明，在急性缺血再灌注損傷的病理生理過程中核因子-кB(nuclear factor kappa-B

2、，NF-кB)起重要作用，而吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)具有抑制NF-кB活性，抗氧化等作用。本研究目的是通過復制兔的心肌梗死模型來觀察心肌缺血晚期再灌注導致的再灌注損傷現(xiàn)象，探討其與核因子NF-кB的關系以及PDTC可能的干預機制。 方法 32只健康家兔隨機分為4組：假手術組(shamgroup，S)、持續(xù)缺血組(persistente ischemia gr

3、oup，I)、晚期再灌注組(lateischemia-reperfusion group，LI/R)、PDTC干預組(PDTC treatment group，P)，每組8只。所有動物行靜脈麻醉，接心電圖機，經胸骨左緣開胸暴露心臟，保持胸膜腔完好，動物行自主呼吸，剪開心包，暴露前降支和回旋支以及回旋支的主要分支左室支，以眼科4—0針線穿過左室支。S組冠狀動脈曠置6小時，I組冠狀動脈持續(xù)結扎6小時，LI/R組結扎冠狀動脈3小時后再灌注3小

4、時，P組結扎冠狀動脈3小時后再灌注3小時，并于再灌注前十分鐘靜脈注入PDTc(200mg/kg)。動物經上述處理后處死，取出心臟，剪取心肌梗死邊緣區(qū)心肌組織。末端脫氧核糖核苷酸轉移酶(TdT)介導的帶熒光的dUTP缺口末端標記(TdT-mediated dUTP nick endlabeling，TUNEL)法測心肌細胞凋亡指數(shù)(apoptotic index，AI)；鏈霉親和素-生物素-過氧化酶復合物法測NF-кB和NF-кB抑制蛋白

5、(IкBα)表達；黃嘌呤氧化法測超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性；比色法測谷胱甘肽還原酶(glutathione RedtJCase，GR)活性；巴比妥酸法測丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量。 結果 與S組相比，LI/R組、P組和I組梗死邊緣區(qū)心肌細胞的SOD、GR活性明顯降低，MDA含量增高，NF-кB、IкBα活性增加，心肌細胞凋亡指數(shù)也顯著升高；LI/R組與

6、I組相比，SOD、GR活性降低，MDA含量增高，NF-кB、IкBα活性和凋亡指數(shù)均上升；P組與LI/R組相比SOD、GR活性升高，MDA含量降低，NF-кB活性降低，IкBα活性增加，心肌細胞凋亡指數(shù)降低；結果均具有統(tǒng)一計學意義(P<0.05)。 結論 心肌缺血晚期再灌注可導致梗死邊緣區(qū)心肌細胞凋亡增加，提示存在再灌注損傷現(xiàn)象。氧化應激增強、NF-кB的過度激活可能是導致晚期再灌注損傷的重要因素。PDTC預處理可改善梗