惡性腫瘤陰虛證與細(xì)胞因子IL-1α、IL-1β、IL-1R及IL-8相關(guān)性的研究.pdf

1、實驗背景： 癌癥目前已經(jīng)成為多發(fā)病、常見病，為居民死亡原因的第一、二位，嚴(yán)重威脅人民的健康。而肺癌在我國城市中的發(fā)病率更是高居癌癥的首位，由于其生物學(xué)特性，很難做到早發(fā)現(xiàn)早治療，超過75﹪的患者就診時就已屬中晚期，治療較果較差<'[1]>。多數(shù)晚期肺癌患者伴有陰虛證，其易引起患者體質(zhì)的惡性消耗，降低患者自身免疫力，這就嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量并降低患者對綜合治療的耐受能力而影響治療措施的進行。要想有效的解決這個問題，首先要弄清陰

2、虛證的發(fā)病學(xué)機理即陰虛證的本質(zhì)，我國在這方面已進行了多年廣泛而深入的研究，但由于陰虛證的本質(zhì)過于復(fù)雜，至今仍尚無定論。 申維璽等<'[2-4]>運用分子生物學(xué)的理論和方法進行研究，在國內(nèi)外首先提出了：陰虛證的本質(zhì)是細(xì)胞因子，其基本發(fā)病學(xué)機理是由于機體在各種致病因素的損害作用下，IL-1、TNF等炎性細(xì)胞因子的基因表達相對增強、生物學(xué)活性相對升高，并由此引發(fā)一系列連鎖反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞因子基因表達調(diào)控失調(diào)，引起細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂的結(jié)果。

3、 實驗?zāi)康模?目前“陰虛證的本質(zhì)是細(xì)胞因子”的論斷還僅僅是一個理論模型，還要通過不斷的實驗研究來證明其正確性。本實驗應(yīng)即是應(yīng)用基因芯片和免疫組化技術(shù)分別從基因水平及蛋白水平兩個層面探討了肺癌出現(xiàn)陰虛證時IL-1α、IL-1β、IL-1R及IL-8表達的變化規(guī)律，來驗證陰虛證的發(fā)病學(xué)機理是由于IL-1、TNF等炎性細(xì)胞因子的基因表達相對增強、生物學(xué)活性相對升高引起細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂的這一理論研究結(jié)論。實驗方法1．應(yīng)用免疫組化

4、方法檢測肺癌陰虛證患者工L-1α、IL-1 β、IL-1R及IL-8的蛋白表達水平選取20例肺癌陰虛證患者和20例肺癌無陰虛患者，其中肺癌陰虛證患者男性9例，女性11例，年齡41-70歲；肺癌無陰虛證患者男性10例，女性10例，年齡37-70歲．以患者手術(shù)后大體肺石蠟包埋組織(材料由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院病理科提供)為材料，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對兩組患者IL-1α、IL-1β、IL-1R及IL-8的蛋白表達情況進行檢測分析。 2

5、．應(yīng)用Affymetrix基因表達譜芯片檢測肺癌及其他疾病陰虛證患者外周血IL-1 α、IL-1 β、IL-1R及IL-8的基因表達水平病例共分為三組，每組兩例，采用1：1做對照。分別為：①胃癌組：包括胃癌陰虛證與其對照病例(胃癌無陰虛)；②結(jié)腸癌組，包括結(jié)腸癌伴陰虛證與其對照病例(結(jié)腸癌無陰虛)；③肺癌組，包括肺癌陰虛證與其對照病例(肺癌無陰虛)。 結(jié)果： 1．免疫組化實驗結(jié)果顯示肺癌陰虛組細(xì)胞內(nèi)IL-1α、IL-1β

6、及IL-8的蛋白表達高于對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)；IL-1R表達水平在兩組中的表達無明顯變化(p>0.05)。 2．基因芯片結(jié)果顯示，肺癌組中，IL-1 α、IL-1β和IL-8的基因表達信號值在陰虛患者中比非陰虛患者有上調(diào)。而IL-1R則較非陰虛患者有下降。在結(jié)腸癌組中IL-1 α、IL-1 β、IL-1R在陰虛患者中比非陰虛患者有上調(diào)，IL-8較非陰虛患者有下降。在胃癌組則IL-1α、IL-1β、IL-1R