可視化動緣探測系統(tǒng)同步檢測人重組促紅細(xì)胞生成素對缺血-再灌注心肌細(xì)胞收縮功能和鈣瞬變的影響.pdf

1、目的：
　　探討人重組促紅細(xì)胞生成素(rHuEPO)預(yù)處理及后處理對大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌細(xì)胞的保護(hù)作用。
　　方法：
　　1、預(yù)處理實(shí)驗(yàn)：Wistar成年雄性大鼠60只分為3組，分別為對照組，缺氧復(fù)氧損傷組(I/R組)、缺氧復(fù)氧損傷+rHuEPO預(yù)處理組(I/R+rHuEPO組)，每組20只。rHuEPO預(yù)處理組大鼠經(jīng)腹腔注射5000u/kg的rHuEPO，對照組和I/R組則注射同體積的生理鹽水。給藥24h后

2、，利用Langendoff離體心灌注模型平衡30min，給予停搏液使心臟停跳90min，再灌注60min。常規(guī)酶解法獲得成年大鼠心室肌細(xì)胞,用可視化動緣探測系統(tǒng)同步檢測rHuEPO預(yù)處理組大鼠心肌細(xì)胞收縮力和鈣瞬變的變化，并與I/R組大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行比較。
　　2、后處理實(shí)驗(yàn)：Wistar成年雄性大鼠60只分為3組，分別為對照組，缺氧復(fù)氧損傷組(I/R組)、缺氧復(fù)氧損傷+rHuEPO后處理組(I/R+rHuEPO組)，每組20只。

3、常規(guī)酶解法獲得成年大鼠心室肌細(xì)胞,用氰化鈉/乳酸鈉灌注造成細(xì)胞化學(xué)缺氧以模擬缺血。缺血15min后以臺氏液或臺氏液加rHuEPO復(fù)氧模擬再灌注30min，常規(guī)酶解法獲得成年大鼠心室肌細(xì)胞,用可視化動緣探測系統(tǒng)同步檢測rHuEPO后處理組大鼠心肌細(xì)胞收縮力和鈣瞬變的變化，并與I/R組大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行比較。
　　結(jié)果：
　　1、發(fā)現(xiàn)rHuEPO預(yù)處理使再灌注后心室肌細(xì)胞肌小節(jié)最大收縮幅度、最大縮短速率、最大復(fù)長速率以及Ca2+熒

4、光比率明顯增大，使Ca2+達(dá)峰值時(shí)程、舒張期Ca2+減少50％時(shí)程明顯減少(P<0.05,n=20)。
　　2、發(fā)現(xiàn)rHuEPO后處理使再灌注后心室肌細(xì)胞肌小節(jié)最大收縮幅度、最大縮短速率、最大復(fù)長速率以及fura-2熒光強(qiáng)度變化明顯增大，使Ca2+達(dá)峰值時(shí)程、舒張期Ca2+減少50％時(shí)程明顯減少(P<0.05,n=20)。
　　結(jié)論：
　　1.首次通過可視化動緣探測系統(tǒng)，對經(jīng)rHuEPO預(yù)處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞和

5、未經(jīng)rHuEPO預(yù)處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮力進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)經(jīng)rHuEPO預(yù)處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞比未經(jīng)rHuEPO預(yù)處理的I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮速度和舒張速度明顯加快，收縮幅度增加。結(jié)果表明，rHuEPO預(yù)處理能使離體I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮力增強(qiáng)，提示rHuEPO對離體I/R大鼠心肌細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用。
　　2.首次通過可視化動緣探測系統(tǒng)，對經(jīng)rHuEPO后處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞和未經(jīng)rHuEPO后處理的離體

6、I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮力進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)經(jīng)rHuEPO后處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞比未經(jīng)rHuEPO后處理的I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮速度和舒張速度明顯加快，收縮幅度增加。結(jié)果表明，rHuEPO后處理能使離體I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮力增強(qiáng)，提示rHuEPO對離體I/R大鼠心肌細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用。
　　3.為了探討心肌收縮力與心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+的關(guān)系，在檢測經(jīng)rHuEPO預(yù)處理和后處理的離體I/R大鼠心肌細(xì)胞收縮力的同時(shí)，同步檢測了離體