CD11b-CD18黏附因子的表達對大鼠自體靜脈移植內(nèi)膜增生的影響.pdf

1、近年來血管移植治療下肢動脈硬化閉塞癥被越來越廣泛的應用，但是手術(shù)后移植物再狹窄制約了這一手術(shù)開展。研究發(fā)現(xiàn)移植后再狹窄的主要機制是移植血管內(nèi)膜增生導致血管閉塞，血管內(nèi)膜增生的形成與炎癥、內(nèi)膜白細胞黏附聚集、平滑肌細胞遷移和增殖以及細胞外基質(zhì)堆積等過程有關(guān)，而黏附分子是上述各過程中的重要因子。
　　目的:本實驗通過對移植靜脈動物模型的實驗研究，探討大鼠自體靜脈移植內(nèi)膜增生程度和移植動物的黏附因子CD11b/CD18表達之間的關(guān)系，為

2、進一步臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法:建立大鼠自體靜脈移植模型，分為4組，實驗A組(n=24)腹腔注射IL-60.1mg/d，連續(xù)注射28天，實驗B組(n=24)未用任何藥物干預，實驗C組注射CD11/CD18的單克隆抗體0.1mg/d，連續(xù)注射28天，實驗D組(n=24)阿司匹林2mg/d灌胃4周。切取大鼠頸外靜脈4mm，將靜脈移植物移植于頸總動脈。在不同時段切取移植靜脈標本，HE染色，光學顯微鏡下觀察移植靜脈血管管壁厚度、管

3、腔大小和內(nèi)膜增生情況。圖像分析系統(tǒng)分別測量內(nèi)膜厚度(IT)、中膜厚度(MT)、管腔面積(LA)，計算IT/MT比值。抽取大鼠1ml肝素鈉抗凝的靜脈血，用流式細胞儀檢測有CD11/CD18表達的細胞數(shù)目。免疫組織化學分析采用S2P法， DAB顯色，計算動脈內(nèi)膜及中膜內(nèi)皮細胞、巨噬細胞及平滑肌細胞中陽性染色標記物的數(shù)目。
　　結(jié)果:流式細胞儀分析顯示有CD11b/CD18表達的細胞數(shù)目變化:A、B、D組的有CD11b/CD18表達的細

4、胞數(shù)在移植術(shù)后2周內(nèi)隨時間逐漸升高，2周左右增加幅度明顯。各組血標本用流式細胞儀測量發(fā)現(xiàn):C組與A組比較，C組表達CD11/CD18的細胞數(shù)有顯著降低(P＞0.05);B組與C組相比較，表達CD11/CD18的細胞數(shù)明顯升高，不同的治療組治療有顯著性差異(P＞0.05)。移植靜脈病理組織學分析HE染色后，光學顯微鏡下觀察，與正常移植頸靜脈和相比較，移植血管在術(shù)后3天開始發(fā)生內(nèi)膜增生，1周后開始出現(xiàn)內(nèi)膜增生，C組增生的平滑肌細胞層數(shù)明顯少

5、于A組，而A組平滑肌細胞增生的層數(shù)明顯多于C組，導致移植靜脈管腔明顯狹窄。術(shù)后各組的IT/MT、IA/MA的差異有統(tǒng)計學意義(P＞0.05).免疫組化DAB染色結(jié)果顯示:各組大鼠移植靜脈內(nèi)均可見有陽性表達，各組隨著時間的推移而增多，2周內(nèi)達高峰，隨后CD11b/CD18表達趨于穩(wěn)定。實驗組增厚的動脈內(nèi)膜及中膜的各層細胞內(nèi)可見大量CD11/CD18棕黃色PCNA顆粒狀陽性染色物質(zhì)，部分融合成片，CD11b/CD18單克隆抗體組CD11b/