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1、目的:利用LPS誘導(dǎo)小鼠ARDS模型及PDTC進(jìn)行干預(yù),檢測(cè)LPS致小鼠ARDS血漿中TNF-α、IL-1β、IL-8和肺組織中CD11b/CD18的表達(dá)水平及PDTC的干預(yù)作用,為臨床PDTC對(duì)ARDS的保護(hù)作用提供進(jìn)一步的理論支持。
方法:54只健康雄性BALB/c小鼠,隨機(jī)分為正常對(duì)照組(N組)、ARDS組(L組)、PDTC干預(yù)組(P+L組),每組18只。N組腹腔注射生理鹽水20ml/kg,L組腹腔注射LPS20mg/k
2、g誘導(dǎo)小鼠ARDS模型,P+L組于LPS注射前30分鐘腹腔注射PDTC120mg/kg實(shí)現(xiàn)對(duì)LPS誘導(dǎo)小鼠ARDS的干預(yù)。每組小鼠分別于造模后4h、8h、12h各取6只,眼眶取血,運(yùn)用ELISA技術(shù)檢測(cè)血漿中細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、IL-8的表達(dá);麻醉后左心室取血,行動(dòng)脈血?dú)夥治鲇?jì)算氧合指數(shù)(PaO2/FiO2);取右肺計(jì)算W/D;取左肺制作石蠟塊,切片,行HE染色,光鏡下觀察肺組織病理改變,免疫組化檢測(cè)肺組織CD11b/CD1
3、8的表達(dá)。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,數(shù)值型變量采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x±s),兩隨機(jī)樣本比較采用t檢驗(yàn),多組比較采用方差分析方法,P≤0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1、各組小鼠一般情況觀察:N組小鼠呼吸平順,精神狀態(tài)好,抓取時(shí)行動(dòng)敏捷;L組小鼠呼吸頻率加快,精神萎靡,抓取時(shí)行動(dòng)遲緩或不活動(dòng);P+L組小鼠呼吸稍促,精神狀態(tài)較L組好轉(zhuǎn),抓取時(shí)行動(dòng)較L組增多。
2、各組小鼠氧合指數(shù)PaO2/F
4、iO2結(jié)果:L組小鼠氧合指數(shù)PaO2/FiO2在4h、8h、12h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯低于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05),且隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)L組小鼠氧合指數(shù)PaO2/FiO2越來(lái)越低;P+L組小鼠氧合指數(shù)PaO2/FiO2與L組比較升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05),但仍低于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。
3、各組小鼠肺組織大體標(biāo)本及肺組織病理改變:N組小鼠肺組織大體標(biāo)本呈粉紅色, HE染色后光鏡下觀
5、察,肺組織未見(jiàn)明顯病理改變;L組小鼠肺組織大體標(biāo)本體積增大,顏色呈暗紅色,表面可見(jiàn)出血點(diǎn),切面見(jiàn)有液體滲出,HE染色后光鏡下觀察,肺組織可見(jiàn)出血、大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及肺泡壁斷裂;P+L組小鼠肺組織大體標(biāo)本體積較N組無(wú)顯著增大,顏色呈紅色,表面見(jiàn)少量出血,HE染色后光鏡下觀察,肺組織見(jiàn)少量出血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡壁斷裂情況較L組減輕。
4、各組小鼠肺組織濕/干重比值(W/D):L組小鼠肺組織W/D比值明顯高于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意
6、義(P≤0.05),且隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)肺水腫情況逐漸加重;P+L組小鼠W/D比值較L組降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05),但仍高于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。
5、各組小鼠血漿TNF-α、IL-1β、IL-8表達(dá):L組小鼠血漿TNF-α、IL-1β、IL-8濃度在4h、8h、12h均明顯高于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05),且隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng),TNF-α、IL-1β、IL-8表達(dá)水平越來(lái)越高;P
7、+L組小鼠血漿TNF-α、IL-1β、IL-8濃度在4h、8h、12h均明顯低于L組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05),但仍高于N組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.05)。
6、各組小鼠肺組織CD11b/CD18表達(dá):以肺組織中出現(xiàn)棕褐色為陽(yáng)性表達(dá),免疫組化結(jié)果顯示N組小鼠肺組織中CD11b/CD18很少表達(dá)或幾乎不表達(dá);L組小鼠肺組織CD11b/CD18呈陽(yáng)性表達(dá),較N組明顯增加,且隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng),陽(yáng)性表達(dá)逐漸增高;P+
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