辛伐他汀對自體移植靜脈內(nèi)膜增生影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察辛伐他汀對自體移植靜脈內(nèi)膜增生的影響并探討其作用機(jī)制。 方法：選用健康成年家兔48只，隨機(jī)分為辛伐他汀實(shí)驗(yàn)組、生理鹽水對照組。術(shù)前3d開始采用灌胃法給予辛伐他汀(10mg/Kg溶于10ml生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組)或等量生理鹽水(對照組)，每天一次，直至術(shù)后取材。所有動物于術(shù)日建立自體靜脈旁路移植模型：利用顯微外科技術(shù)將右頸外靜脈端側(cè)吻合于同側(cè)頸總動脈。術(shù)后3、7、28d切取移植靜脈，同時(shí)取對側(cè)未移植靜脈作為正常靜脈參照。分別

2、行HE染色、Verhoeff彈性纖維染色觀察組織病理變化，計(jì)算機(jī)病理圖象分析系統(tǒng)測量新生內(nèi)膜厚度及面積，免疫組織化學(xué)方法檢測靜脈壁增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)以觀察細(xì)胞增殖情況，半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測靜脈壁基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表達(dá)，明膠酶譜法(substrategelatinzymography)檢測MMP-2、MMP-9活性，比較各組之間的差別。同時(shí)應(yīng)用

3、免疫組化法檢測移植靜脈壁MMP-2蛋白以及平滑肌細(xì)胞α-肌動蛋白(SMCα-actin)表達(dá)情況。 結(jié)果：術(shù)后7d、28d實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜增生程度明顯受到抑制，與對照組比較新生內(nèi)膜厚度分別減少18％、45％(P＜0.05和P＜0.01)。術(shù)后3d、7d，辛伐他汀實(shí)驗(yàn)組移植靜脈壁PCNA陽性細(xì)胞數(shù)比對照組顯著減少(P＜0.05)，SMCα-actin免疫組化結(jié)果證實(shí)PCNA陽性細(xì)胞主要為SMC。與正常靜脈相比，對照組移植靜脈壁MMP-2

4、、MMP-9mRNA表達(dá)及活性明顯增強(qiáng)，并持續(xù)到術(shù)后28d，同時(shí)觀察到移植靜脈壁MMP-2蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)，術(shù)后28d仍可見MMP-2蛋白在新生內(nèi)膜散在分布。但在實(shí)驗(yàn)組，術(shù)后3d、7d移植靜脈壁MMP-2、MMP-9mRNA表達(dá)明顯受到抑制，與對照組相比差異有非常顯著意義(P＜0.01)：術(shù)后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組移植靜脈壁MMP-2、MMP-9活性顯著低于對照組，7d時(shí)MMP-2與MMP-9的活性分別降低63％、72％(P＜0.01)。