蘆丁對衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能影響的形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的：蘆丁在抗氧化、抗炎癥、抗腫瘤等方面都具有重要的的作用，是良好的自由基清除劑，能抑制脂質(zhì)過氧化過程，對組織細(xì)胞免受活性氧族的攻擊起到很好的保護(hù)作用。但是，關(guān)于蘆丁對衰老和學(xué)習(xí)記憶影響的研究很少。本實驗對衰老小鼠給予蘆丁灌胃后，觀測蘆丁對衰老小鼠大腦皮質(zhì)和海馬NOS活力、nNOS和SS表達(dá)的影響，探索蘆丁對衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能影響的形態(tài)學(xué)變化。 方法：選用昆明小鼠60只(30±5g)，隨機(jī)分為對照組、衰老組、陽性對照組和低、高

2、劑量蘆丁給藥組，每組12只。對衰老組、陽性對照組和低、高劑量蘆丁給藥組小鼠皮下注射D-半乳糖(D-gal)(120mg·kg-1·-1)，連續(xù)6w，建成亞急性衰老模型。對照組小鼠皮下注射等量生理鹽水，連續(xù)6w。對陽性對照組小鼠給予腦復(fù)康(30mg·kg-1)灌胃，低、高劑量蘆丁給藥組給予蘆丁(20mg·kg-1，40mg·kg-1)灌胃，連續(xù)6w。灌胃與皮下注射同步進(jìn)行。各組動物普飼普水喂養(yǎng)6w后，用Y-迷宮實驗測試各組小鼠學(xué)習(xí)記憶行為

3、變化；用NADPH-d組織化學(xué)和ABC免疫組織化學(xué)方法分別測定小鼠大腦皮層和海馬結(jié)構(gòu)的NOS活力和nNOS、SS陽性神經(jīng)元蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.Y-迷宮實驗結(jié)果：與衰老組小鼠學(xué)會次數(shù)(134.75±52.39)相比，其它各組小鼠迷宮實驗的學(xué)會次數(shù)明顯減少(p＜0.05)；與陽性對照組小鼠學(xué)會次數(shù)(87.86±54.56)比較，高劑量蘆丁給藥組小鼠迷宮實驗的次數(shù)(49.22±27.05)明顯減少(P＜0.05)，而其

4、余實驗組小鼠迷宮學(xué)會次數(shù)無明顯改變。 2.NADPH-d組化反應(yīng)結(jié)果： 大腦皮層：與衰老組相比，其余各組的NOS活性升高(p＜0.01)；與對照組相比，低劑量蘆丁給藥組的NOS活性明顯降低(P＜0.05)。CA1區(qū)：各組間的NOS活性均有顯著性差異(P＜0.05)。CA3區(qū)：陽性對照組、低劑量和高劑量蘆丁給藥組比對照組、衰老組的NOS活性高(P＜0.05)。齒狀回：各組間NOS活性均有顯著性差異(P＜0.05)。

5、 3.ABC免疫組化反應(yīng)結(jié)果： 3.1nNOS陽性神經(jīng)元 大腦皮層：與衰老組nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(44.00±3.39)相比，各實驗組的nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目均明顯增多(p＜0.05)；低劑量和高劑量蘆丁給藥組的nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(69.80±7.40，73.25±3.77)比對照組、陽性對照組的nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(58.40±6.27，53.00±10.65)明顯增多(p＜0.05)。CA1區(qū)：各組間NADP

6、H-d陽性神經(jīng)元數(shù)目均有顯著性差異(p＜0.05)。CA3區(qū)：與衰老組nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(8.40±0.55)相比，其余各組nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯增多(P＜0.05)；低劑量和高劑量蘆丁給藥組nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(49.60±2.17、60.75±1.63)比對照組和陽性對照組的nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(10.20±1.10、11.40±0.89)明顯增多(p＜0.05)。齒狀回：低劑量和高劑量蘆丁給藥組nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(

7、25.60±2.88、30.00±9.63)比對照組、衰老組和陽性對照組的nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)目(16.40±2.61、13.80±1.92、13.00±2.30)明顯增多(p＜0.05)。 3.2SS陽性神經(jīng)元 大腦皮層：各實驗組之間的生長抑素(somatostatin，SS)陽性神經(jīng)元的數(shù)目無明顯變化(P＞0.05)。CA1區(qū)：與衰老組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(24.20±0.84)相比，其余各組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯增多

8、(P＜0.05)；高劑量蘆丁給藥組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(56.00±7.87)比其它各組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目都明顯增多(P＜0.05)；低劑量蘆丁給藥組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(31.60±0.89)比陽性對照組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(39.00±1.58)明顯減少(P＜0.05)。CA3區(qū)：低劑量和高劑量蘆丁給藥組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(15.20±1.64、15.6±1.34)比對照組、衰老組、陽性對照組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(12.60±1.52、12

9、.80±0.84、13.80±2.59)明顯增多(P＜0.05)。齒狀回：與衰老組的SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(15.30±5.36)相比，陽性對照組和高劑量蘆丁給藥組的SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(23.00±4.74、27.80±8.20)明顯增多(P＜0.05)；高劑量蘆丁給藥組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目比對照組SS陽性神經(jīng)元數(shù)目(17.60±2.20)明顯增多(P＜0.05)。 結(jié)論：蘆丁對亞急性衰老小鼠學(xué)習(xí)記憶功能有明顯改善的作用。其作用機(jī)制可