阿爾茨海默病區(qū)域選擇性損傷的機(jī)制研究和治療新策略.pdf

1、目的：以阿爾茨海默病區(qū)域選擇性損傷的內(nèi)在機(jī)制為出發(fā)點(diǎn)，探討小腦神經(jīng)元代謝物對大鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層和海馬區(qū)β淀粉樣蛋白（β-Amyloid，Aβ）含量的影響及可能的作用機(jī)制，同時(shí)探討不同腦區(qū)PPARg 活性差異在阿爾茨海默病區(qū)域選擇性損傷中的作用及作用機(jī)制，并由此提供一種治療阿爾茨海默病的新思路。
　　 方法：利用腦立體定位儀第四腦室抽取小腦腦脊液或通過細(xì)胞培養(yǎng)收集并濃縮小腦條件培養(yǎng)基，注射到大鼠及轉(zhuǎn)基因小鼠的側(cè)腦室內(nèi)，飼養(yǎng)一

2、周后，斷頭法處死取海馬及皮層組織，通過免疫組織化學(xué)、熒光染色和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測大腦皮層和海馬區(qū)的Aβ含量和Aβ斑塊沉積量，并用Western Blot的方法檢測胰島素降解酶（insulin-degrading enzyme，IDE）和中性內(nèi)肽酶（neprilysin，NEP)的表達(dá)情況。
　　 同時(shí)，利用腦立體定位儀向APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的第四腦室中注入PPARg抑制劑GW9662，飼養(yǎng)一周后進(jìn)行行為學(xué)檢測，然后斷頭法處

3、死取海馬及皮層組織，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、熒光染色和免疫組織化學(xué)檢測小腦Aβ含量和Aβ斑塊沉積量，并用Western Blot的方法檢測胰島素降解酶（insulin-degrading enzyme，IDE）的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：大鼠小腦腦脊液自體輸入減少其海馬區(qū)Aβ斑塊沉積，降低其大腦皮層中可溶性和不可溶性Aβ的含量，并上調(diào)大鼠大腦皮層區(qū)IDE的表達(dá)；小腦條件培養(yǎng)基中的小腦神經(jīng)元代謝物可以促進(jìn)神經(jīng)元對Aβ的清除，并降低AP

4、P/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠皮層和海馬中的Aβ含量和斑塊沉積量，改善APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，同時(shí)使得海馬神經(jīng)元IDE及NEP的表達(dá)量增加。另外，小腦腦脊液中的小腦神經(jīng)元代謝物同樣也能降低APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠皮層和海馬中的Aβ含量和斑塊沉積量，并改善APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。此外，抑制APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠小腦的PPARg活性可以顯著增加其小腦可溶性Aβ和不可溶性Aβ的含量，增加小腦Aβ斑塊沉積量，并使得APP

5、/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的運(yùn)動協(xié)調(diào)功能發(fā)生障礙；同時(shí)，小腦IDE的表達(dá)存在顯著下調(diào)。
　　 結(jié)論：小腦神經(jīng)元代謝物可以降低大鼠及APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠大腦皮層和海馬區(qū)內(nèi)的Aβ含量及改善APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的認(rèn)知障礙。這種保護(hù)作用是通過上調(diào)IDE和NEP的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的；并且小腦PPARg的高活性對于AD的病理損傷也具有抵抗作用，這種保護(hù)作用可能是通過上調(diào)IDE的表達(dá)、增加Aβ的降解從而實(shí)現(xiàn)小腦對AD病理損傷抵抗的。以上研究結(jié)果為阿