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1、目的:測(cè)定阿霉素與NS-398對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用以及對(duì)Survivin表達(dá)的影響,探討其誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的機(jī)制。 方法:用不同濃度的阿霉素與NS-398作用于細(xì)胞株HepG2,應(yīng)用MTT法觀(guān)測(cè)阿霉素與NS-398對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的抑制,以免疫熒光檢測(cè)HepG2細(xì)胞中 survivin蛋白表達(dá)的改變,用RT-PCR 檢測(cè)survivin mRNA含量的改變。 結(jié)果:(1)阿霉素對(duì)HepG2細(xì)胞有明顯抑制作用
2、,在與NS-398聯(lián)合應(yīng)用后其抑制作用更強(qiáng);(2)未加藥物之前,在HepG2細(xì)胞中survivin蛋白和mRNA表達(dá)較強(qiáng),并且survivin蛋白多位于胞漿中而胞核中較少,survivin蛋白的熒光值為68.971±1.155,survivin mRNA/GAPDH mRNA的比值為0.918±0.022;(3)應(yīng)用阿霉素處理后HepG2細(xì)胞中survivin蛋白表達(dá)降低熒光值為47.629±0.864,survivin mRNA/ G
3、APDH mRNA的比值為0.748±0.0138,在與NS-398聯(lián)用后survivin蛋白的熒光值為27.543±0.747,survivin mRNA/ GAPDH mRNA的比值為0.480±0.013。 結(jié)論:(1)survivin蛋白和mRNA在HepG2細(xì)胞中呈強(qiáng)表達(dá),并且survivin蛋白在胞漿中表達(dá)較高,而胞核中較少;(2)阿霉素能抑制HepG2細(xì)胞增殖并呈劑量依賴(lài)性,在與NS-398聯(lián)合應(yīng)用后其抑制作用增強(qiáng)
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