靶向survivin的siRNA聯(lián)合5-FU轉(zhuǎn)染抑制肝細胞株HepG2增殖的研究.pdf

1、靶向survivin的SiRNA聯(lián)合5FU轉(zhuǎn)染抑制肝細胞株HepG2增殖的研究摘要目的：研究靶向survivin的(小分子干擾RNA)siRNA和(氟尿嘧啶)5一FU聯(lián)用對肝癌細胞HepG2的增殖抑制及凋亡的影響。方法：將HepG2細胞分為空白對照組、陰性對照組、5FU處理組、siRNA轉(zhuǎn)染組、5FUsiRNA轉(zhuǎn)染組。轉(zhuǎn)染采用脂質(zhì)體法。RTPCR法檢測HepG2細胞survivinmRNA轉(zhuǎn)錄水平；MTT法檢測靶向survivin的si

2、RNA和5FU對HepG2細胞增殖的抑制作用；流式細胞術(shù)檢測HepG2細胞凋亡情況。結(jié)果：空白對照組、陰性對照組、5一FU處理組survivinmRNA表達無明顯變化(PO05)，siRNA轉(zhuǎn)染組、5一FUsiRNA轉(zhuǎn)染組survivinmRNA表達明顯下降(F=280326，q=472～734，PO05)。5FUsiRNA轉(zhuǎn)染組增殖抑制率為5158％135％，與其它各組相比抑制率明顯增高(F=280326，q=527’984，PO05

3、)。5FUsiRNA組與其它各組相比細胞凋亡率明顯增高(F=1356868，q=11047“32716，PO01)。結(jié)論：將靶向survivin的siRNA和5一FU聯(lián)合應用可以顯著抑制肝癌細胞survivin基因表達，并協(xié)同抑制HepG2細胞增殖，共同發(fā)揮誘導細胞凋亡作用。關(guān)鍵詞：Si砌悄；survivin；肝癌；5FU≥i妒f，。目錄弓I言1第1章材料與方法311材料3111主要試劑與儀器3112細胞株312方法4121surviv

4、in基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建4122細胞分組和轉(zhuǎn)染”4123MTT法檢測細胞增值抑制率的變化一4124流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡比率5125RTPCR術(shù)檢測survivinmRNA水平5126統(tǒng)計學分析5第2章結(jié)果621各組HepG2細胞增殖抑制率比較622各組細胞凋亡比率比較623RTPCR法檢測survivinmRNA水平8第3章討論第4章結(jié)論參考文獻綜述綜述參考文獻攻讀學位期間的研究成果致謝學位論文獨創(chuàng)性聲明、學位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明300