我國重要蚊蟲感染和傳播西方馬腦炎病毒的實驗研究.pdf

1、西方馬腦炎病毒(western equine encephalomyelitis virus，WEEV)屬于披膜病毒科(Togaviridae)甲病毒屬(Alphaviruses)。它能夠引起人類和馬等動物的致死性疾病——腦炎，對馬的病死率可達50％，對人的病死率最高可達10％，嬰幼兒患者常會導致智力低下、行為失常等。目前已知該病主要分布于加拿大、美國西部和中部、墨西哥、圭亞那、巴西、阿根廷、秘魯、智利和烏拉圭等國家。該病在北美地區(qū)呈地

2、方性流行，以不規(guī)則的間隔在馬和人群中引起流行。環(huán)跗庫蚊(Culex tarsalis)已被證明是北美地區(qū)西方馬腦炎病毒的主要傳播媒介，同時血清學調(diào)查證明了鳥類在病毒循環(huán)中的作用。在自然界中，病毒只在野鳥—蚊之間進行傳播，主要是在環(huán)跗庫蚊與野鳥之間；人和馬是其非固有的感染對象，稱為“終末宿主”。此外，經(jīng)證實能夠自然或?qū)嶒炇腋腥網(wǎng)EEV的還有其它庫蚊屬(Culex)、按蚊屬(Anopheles)、伊蚊屬(Aedes)等7個屬20多種蚊蟲，也

3、有從虱、蜱、螨等節(jié)肢動物體內(nèi)分離病毒的報道。雖然西方馬腦炎只在美洲大陸上發(fā)生，但其仍然是國際嚴密監(jiān)控的人畜共患傳染病。除了美洲以外，波蘭和前蘇聯(lián)也曾報道從正常人血中測得西方馬腦炎抗體，1962年首次從俄羅斯分離出西方馬腦炎病毒株Y62-33。我國1990年分別從新疆烏蘇縣的一組赫坎按蚊(Anopheleshyrcanus)和博樂縣的全溝硬蜱(Ixodes persulcatus)中分離出WEEV，這是在歐亞大陸除俄羅斯外發(fā)現(xiàn)的第二例WE

4、EV分離的報道。在對我國人體血清學調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，WEEV抗體陽性率為2.71％。這些情況都表明了WEEV在我國的存在。近年來我國每年均有大量不明原因發(fā)熱及腦炎病例的報道，提示W(wǎng)EEV可能是我國感染性疾病的新病原之一。此外，WEEV被列為二類生物恐怖試劑，如果WEEV經(jīng)氣溶膠方式撒布后，當?shù)氐乃拗鲃游锶瑛B類等被感染，那么易感蚊蟲就有可能通過吸血將西方馬腦炎傳播給人類，造成更大范圍的傳染病暴發(fā)。因此針對WEEV對我國潛在的威脅，我們首先需要明

5、確在我國的一些優(yōu)勢種蚊蟲能否感染和傳播WEEV，了解它們對WEEV的傳播能力，結(jié)合生態(tài)習性確定哪些是主要的潛在媒介，以便制訂應對一旦西方馬腦炎暴發(fā)后的相應的防治策略。 在我國，淡色庫蚊(Cx．p. pallens)和致倦庫蚊(Cx．p. quinquefasciatus)是尖音庫蚊復合組(Cx．pipiens Complex)成員，嗜吸人血，兼吸禽血，是我國城鎮(zhèn)的優(yōu)勢蚊種；白紋伊蚊(Ae．a(chǎn)lbopictus)和埃及伊蚊(Ae．

6、aegypti)是登革熱的主要傳播媒介，也是我國的重要蚊種；三帶喙庫蚊(Cx．tritaeniorhynchus)廣泛地分布于我國水稻種植區(qū)，嗜吸畜血，兼吸人、雞血等。本研究以這幾種在我國十分重要的蚊種為對象，在實驗室條件下，通過蚊蟲叮咬人工感染W(wǎng)EEV的來亨雞，采用免疫熒光檢測病毒抗原和RT-PCR檢測病毒核酸等方法檢測蚊蟲體內(nèi)病毒，確定受試蚊蟲對WEEV的易感性和傳播能力；探討蚊蟲對WEEV的易感機制，為進一步深入理解病毒與媒介的相

7、互作用，尋求對病媒蚊蟲的有效防控手段提供科學依據(jù)。本工作主要結(jié)果如下： 1．我國重要蚊種對WEEV的經(jīng)口感染率在實驗室條件下，叮咬人工感染W(wǎng)EEV的來亨雞后，淡色庫蚊、致倦庫蚊、三帶喙庫蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊對WEEV均易感，其感染率分別為45.5％、60.0％、80.0％、36.7％和25.0％，不同蚊種之間的感染率有顯著性差異(x<'2>=13.709，P=0.008)，其中三帶喙庫蚊感染率最高，為80.0％。 2．

8、我國重要蚊種對WEEV的刺叮傳播率在實驗室條件下，淡色庫蚊、致倦庫蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊都能通過刺叮吸血將體內(nèi)的WEEV傳播給易感動物1～3日齡的來亨雞，傳播率分別為40.74％、53.13％、57.14％和45.16％，不同蚊種之間的傳播率沒有顯著性差異(x<'2>=1.879，P=0.598)。 3．WEEV在蚊蟲體內(nèi)的散布率在實驗室條件下，WEEV在已感染的淡色庫蚊、致倦庫蚊、三帶喙庫蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊體內(nèi)均能擴散至足

9、，散布率分別為60.0％、61.1％、75.0％、54.5％和50.0％。不同蚊種間的散布率沒有顯著性差異(x<'2>=1.229，P=0.873)。 4．WEEV在感染蚊蟲體內(nèi)擴散與蚊蟲經(jīng)口傳播病毒的相關性研究本研究通過對感染和傳播實驗中的單只蚊蟲進行標記，根據(jù)它們感染、擴散和傳播的結(jié)果進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，感染病毒并擴散至足的絕大多數(shù)蚊蟲能夠?qū)⒉《緜鞑ソo易感動物、也有極少數(shù)不能經(jīng)口傳播；一些感染病毒但未擴散至足的蚊蟲也是一部分能

10、夠經(jīng)口傳播而另一部分不能；還存在一些體內(nèi)檢測不出病毒，其叮咬的來亨雞卻能被感染。 5．西方馬腦炎病毒抗原在經(jīng)口感染淡色庫蚊體內(nèi)的分布淡色庫蚊在經(jīng)口感染W(wǎng)EEV 3～4天后，部分蚊蟲中腸壁見有WEEV的侵染。個別蚊蟲后腸出現(xiàn)陽性斑塊；第7～10d，部分蚊蟲中腸、馬氏管、卵巢、后腸均見病毒侵染；第10～14d，除中腸和卵巢等呈陽性反應外；可見唾液腺亦被病毒侵染；但有些蚊蟲個體僅在中腸有陽性反應，其它組織器官均為陰性；還有部分蚊蟲個體