應(yīng)答蛋白基因表達(dá)在鎘接觸中作為生物標(biāo)志物的研究.pdf

1、本文應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)和免疫印跡(Westernblot)觀察鎘對人胚腎細(xì)胞的MT亞型和HO-1mRNA和蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)作用。同時也觀察鎘對體外培養(yǎng)的人淋巴細(xì)胞MT各亞型的誘導(dǎo)表達(dá)作用。并在職業(yè)性鎘接觸人群中檢測其變化，初步探討其在鎘接觸中作為生物標(biāo)志物的可行性。并應(yīng)用適用于人群研究實時熒光定量RT-PCR方法，測定鎘接觸人群中外周血淋巴細(xì)胞的MT-1AmRNA的表達(dá)水平。結(jié)果提示鎘誘導(dǎo)人胚腎細(xì)胞MT亞型和HO-1m

2、RNA和蛋白表達(dá)規(guī)律一致，其誘導(dǎo)調(diào)控在轉(zhuǎn)錄水平，mRNA的表達(dá)水平能很好的反映鎘接觸水平。人群研究顯示MT亞型mRNA表達(dá)水平與其鎘接觸水平呈現(xiàn)出良好的劑量-效應(yīng)關(guān)系，提示這些基因的表達(dá)可反映鎘接觸水平，可作為鎘接觸的生物標(biāo)志物。結(jié)果還顯示MT-1A基礎(chǔ)表達(dá)水平的改變隨尿鎘的增高而增高，且與反映腎功能指標(biāo)顯著相關(guān)，提示其可作為鎘致腎損害效應(yīng)的生物標(biāo)志物。以靶分子效應(yīng)指標(biāo)(應(yīng)答蛋白基礎(chǔ)表達(dá)水平)和靶器官效應(yīng)指標(biāo)(尿蛋白)計算鎘接觸的BMD

3、L值的結(jié)果顯示，計算血鎘BMDL值時，MT-1A，1F的基礎(chǔ)表達(dá)改變的臨界值改變低于HO-1的基礎(chǔ)表達(dá)改變，提示MT可作為鎘接觸生物標(biāo)志物較HO-1敏感；計算血鎘、尿鎘BMDL值時，靶分子應(yīng)答蛋白基礎(chǔ)表達(dá)水平均低于靶器官腎功能改變的臨界值，提示靶分子的改變早于靶器官的改變，在鎘接觸中用靶分子作為生物標(biāo)志物似乎更敏感。應(yīng)用實時熒光定量RT-PCR測定鎘接觸中MT-1A的表達(dá)與傳統(tǒng)RT-PCR結(jié)果一致，提示可用這種方法進行大樣本人群研究。但