TREK-1過表達(dá)與脈絡(luò)寧注射液對氧糖剝奪星形膠質(zhì)細(xì)胞及其谷氨酸代謝的作用.pdf

1、目的：觀察雙孔鉀通道TREK-1過表達(dá)及脈絡(luò)寧注射液對氧糖剝奪星型膠質(zhì)細(xì)胞（astrocyte,Ast）存活率和谷氨酸（Glu）攝取能力的影響，探討TREK-1在Glu興奮性毒性中的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：原代培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞，運(yùn)用DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染法構(gòu)建星形膠質(zhì)細(xì)胞TREK-1過表達(dá)模型，采用細(xì)胞氧糖剝奪（Oxygen Glucose Deprivation,OGD）模型，模擬體內(nèi)腦缺血環(huán)境，實(shí)驗分為對照組、TREK-1過表達(dá)組、

2、脈絡(luò)寧注射液組，分別于氧糖剝奪2h、4h、6h、8h后，MTT法檢測細(xì)胞增殖率；FITC/Propidium Iodide雙染色法和Hoechast33258染色法檢測細(xì)胞凋亡；Glu檢測試劑盒法檢測細(xì)胞攝取率；RT-PCR法檢測Glu特異性轉(zhuǎn)運(yùn)體GLT-1、嘌呤能受體P2X7、谷氨酰胺合酶(GS)、凋亡信號因子Caspase-3和TREK-1通道的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.運(yùn)用大鼠TREK-1 DNA重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染星形

3、膠質(zhì)細(xì)胞，TREK-1過表達(dá)模型構(gòu)建成功；
　　2.在生理條件下，TREK-1過表達(dá)及脈絡(luò)寧液對星形膠質(zhì)細(xì)胞活性無明顯影響，而在氧糖剝奪后，TREK-1過表達(dá)及脈絡(luò)寧注射液均能降低其細(xì)胞凋亡率；
　　3.氧糖剝奪星形膠質(zhì)細(xì)胞的Glu攝取能力代償性增強(qiáng)，TREK-1過表達(dá)、脈絡(luò)寧注射液干預(yù)，二者均能增強(qiáng)均能增強(qiáng)其Glu攝取能力；
　　4.TREK-1過表達(dá)及脈絡(luò)寧注射液均可提高氧糖剝奪模型星形膠質(zhì)細(xì)胞的GLT-1、GS、