內皮抑素抑制脈絡膜新生血管的實驗研究.pdf

1、第一部分重組內皮抑素蛋白抑制脈絡膜新生血管的實驗研究;目的:觀察內皮抑素蛋白抑制激光誘導的大鼠脈絡膜新生血管(Choroidal Neovascularization CNV)的效果.結論:1)內皮抑素可以有效抑制CNV的形成;2)脈絡膜血管平鋪及CD105檢測對于CNV的定性、定量評估具有一定意義;3)尚有一些問題值得進一步探討:該研究中采用的重組內皮抑素蛋白生產純化工藝復雜,且半衰期短,要保持體內的有效濃度需要反復注射,增加了眼組織

2、創(chuàng)傷、感染機會.因而需要尋求一種新的治療方式,使內皮抑素在體內能夠持續(xù)產生和釋放.第二部分內皮抑素基因轉染靶細胞——Brown Norway大鼠視網膜色素上皮細胞的培養(yǎng);目的:探索一種有效的體外分離、培養(yǎng)大鼠視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細胞的方法,建立大鼠RPE細胞體外培養(yǎng)模式,為下一步應用轉基因技術體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達人內皮抑素的RPE細胞做準備.結論:兩步酶分層消化法是分離培養(yǎng)大鼠RPE

3、細胞的理想方法,培養(yǎng)的大量細胞可用于RPE的體外實驗研究.第三部分Brown Norway大鼠視網膜色素上皮細胞內皮抑素轉基因體外培養(yǎng)表達研究;目的:應用轉基因技術體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達人內皮抑素的視網膜色素上皮細胞(RPE),為脈絡膜新生血管的基因治療奠定基礎.結論:經電轉移法及脂質體介導轉染法獲得體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達內皮抑素的RPE細胞是可行的,轉染成功的RPE細胞能夠穩(wěn)定表達內皮抑素蛋白,所表達的內皮抑素蛋白具有生物活性.第四部分脂質體介導