內(nèi)皮抑素抑制脈絡(luò)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分重組內(nèi)皮抑素蛋白抑制脈絡(luò)膜新生血管的實(shí)驗(yàn)研究;目的:觀察內(nèi)皮抑素蛋白抑制激光誘導(dǎo)的大鼠脈絡(luò)膜新生血管(Choroidal Neovascularization CNV)的效果.結(jié)論:1)內(nèi)皮抑素可以有效抑制CNV的形成;2)脈絡(luò)膜血管平鋪及CD105檢測對于CNV的定性、定量評估具有一定意義;3)尚有一些問題值得進(jìn)一步探討:該研究中采用的重組內(nèi)皮抑素蛋白生產(chǎn)純化工藝復(fù)雜,且半衰期短,要保持體內(nèi)的有效濃度需要反復(fù)注射,增加了眼組織

2、創(chuàng)傷、感染機(jī)會(huì).因而需要尋求一種新的治療方式,使內(nèi)皮抑素在體內(nèi)能夠持續(xù)產(chǎn)生和釋放.第二部分內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞——Brown Norway大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的培養(yǎng);目的:探索一種有效的體外分離、培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細(xì)胞的方法,建立大鼠RPE細(xì)胞體外培養(yǎng)模式,為下一步應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達(dá)人內(nèi)皮抑素的RPE細(xì)胞做準(zhǔn)備.結(jié)論:兩步酶分層消化法是分離培養(yǎng)大鼠RPE

3、細(xì)胞的理想方法,培養(yǎng)的大量細(xì)胞可用于RPE的體外實(shí)驗(yàn)研究.第三部分Brown Norway大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞內(nèi)皮抑素轉(zhuǎn)基因體外培養(yǎng)表達(dá)研究;目的:應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達(dá)人內(nèi)皮抑素的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE),為脈絡(luò)膜新生血管的基因治療奠定基礎(chǔ).結(jié)論:經(jīng)電轉(zhuǎn)移法及脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法獲得體外培養(yǎng)穩(wěn)定表達(dá)內(nèi)皮抑素的RPE細(xì)胞是可行的,轉(zhuǎn)染成功的RPE細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá)內(nèi)皮抑素蛋白,所表達(dá)的內(nèi)皮抑素蛋白具有生物活性.第四部分脂質(zhì)體介導(dǎo)