貴州地區(qū)燃煤型氟中毒人群氧化損傷的研究.pdf

1、目的：探討氧化損傷在燃煤型地方性氟中毒發(fā)生發(fā)展中的作用，為貴州地區(qū)地方性氟中毒防治提供一定的理論支持。 方法：按照歷史資料和國家標準，對貴州省畢節(jié)地區(qū)歷史氟病區(qū)進行流行病學調(diào)查，并從織金縣、金沙縣獲得氟中毒輕重病例共計121例，從畢節(jié)市周邊農(nóng)村獲得正常對照23例，搜集上述樣本的血清和EDTA-K<,2>抗凝全血。玉米和辣椒氟含量檢測參照《食品中氟的測定方法(GB/T5009.18-1996)》；飲水氟含量檢測參照《地方性氟中毒病

2、區(qū)飲水氟化物的測定方法(WS/T106-1999)》；煤及土壤中總氟測定參照《燃燒水解-離子選擇電極法(WS/T88-1996)》：空氣氟含量檢測參照《環(huán)境空氣氟化物質(zhì)量濃度的測定：濾膜一氟離子選擇電極法(GB/T 15434-1995)》：尿氟含量檢測參照《尿中氟化物測定。離子選擇電極法標準(WS/T 89-1996)》；采用氧化指標專用測試試劑盒檢測血液中的抗氧化物酶銅/鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)，谷胱甘肽過氧化物酶(G

3、SH-Px)，過氧化氫酶(CAT)的活性以及血清中氧化損傷產(chǎn)物丙二醛(MDA)的含量；采用原子吸收分光光度計(AAS)檢測血清中與抗氧化物酶相關的微量元素Cu，Zn的含量；采用高效液相色譜法(HPLC)測定血清維生素E和維生素C的含量；采用逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)與凝膠電泳分析法檢測樣品Cu/Zn-SOD的mRNA相對表達情況。 結果：1、患者血液中的抗氧化物酶Cu/Zn-SOD、GSH-Px、CAT的活性與正常人比較均下降

4、。其中血液中GSH-PX的活性，與正常組之間比較，在金沙、織金兩地的氟中毒患者中下降明顯(P<0.01)，兩地區(qū)的重病組也比輕病組下降明顯(P<0.01)，在金沙、織金兩地輕病組之間比較，織金地區(qū)輕病組酶活性低于金沙地區(qū)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在兩地重病組之間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義。各患病組血清中Cu/Zn-SOD的活性均低于正常組(P<0.01)，織金地區(qū)重病組血清中Cu/Zn-SOD的活性低于當?shù)剌p病組(P<0.01)

5、，金沙地區(qū)重病組血清中Cu/Zn-SOD的活性高于織金地區(qū)重病組(P<0.01)，金沙地區(qū)重病組血清中Cu/Zn-SOD的活性低于當?shù)剌p病組(P<0.05)，但在兩地輕病組間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義。織金，金沙兩地重病組紅細胞中Cu/Zn-SOD的活性低于正常組(P<0.05)，但在織金，金沙兩地的輕、重病組以及同地區(qū)輕、重病組之間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義。CAT在血清中的活性各患病組與正常組間比較下降明顯(P<0.01)，在金沙地區(qū)、

6、織金地區(qū)輕、重病組間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2、各患病組血清中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量比正常組顯著增加(P<0.01)，金沙、織金地區(qū)重病組MDA含量分別高于當?shù)剌p病組(P<0.01)，織金，金沙兩地輕病組間比較，織金地區(qū)輕病組血清中MDA含量高于金沙地區(qū)輕病組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，兩地重病組間比較，血清中MDA的含量差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3、地方性氟中毒患者血清內(nèi)的微量元素銅、鋅以及維生

7、素E、維生素C含量與正常人群相比均有所下降。銅元素在金沙、織金兩地重病組血清中的含量均顯著低于同地區(qū)輕病組，各患病組均顯著低于正常組(P<0.01)，金沙與織金輕病組間，以及兩地重病組間分別比較，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。血清中鋅元素含量分別在金沙、織金兩地的不同病情患者之間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但是各患病組與正常組相比，血清中鋅元素鋅含量顯著降低(P<0.01)。與正常組比較，血清鋅銅比值在金沙、織金兩地

8、的重病組中升高(P<0.05)，織金地區(qū)重病組鋅銅比值高于輕病組(P<0.05)，金沙地區(qū)輕、重病組間比較鋅銅比值的差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。血清中維生素E含量在同地區(qū)輕、重病組間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，與正常組間比較，兩地的各患病組中維生素E含量下降(P<0.05)，在兩地輕病組之間和兩地重病組之間比較，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。血清中維生素C的含量各患病組均顯著低于正常組(P<0.01)，金沙地

9、區(qū)輕、重病組血清維生素C的含量分別高于織金地區(qū)相同病情組(P<0.05)。4、地氟病患者血液中，Cu/Zn-SOD的基因表達下降。兩地輕、重病組同正常組間比較降低明顯(P<0.05)，金沙地區(qū)重病組Cu/Zn-SOD的基因表達量與輕病組比較降低明顯(P<0.05)，而在織金地區(qū)輕、重病組之間以及兩地相同病情的患者組之間比較Cu/Zn-SOD的基因表達量差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論：1、本實驗通過對慢性燃煤型地方性氟

10、中毒患者機體內(nèi)與抗氧化能力相關的酶活性、微量元素含量指標進行檢測，同時結合流行病學調(diào)查資料，證實了燃煤型地方性氟中毒患者體內(nèi)同樣存在氧化損傷，并與當?shù)厣瞽h(huán)境密切相關，為今后的燃煤型地方性氟中毒防治提供了理論依據(jù)；2、本實驗首次對氟中毒患者機體內(nèi)Cu/Zn-SODmRNA相對表達量進行檢測，發(fā)現(xiàn)慢性燃煤型地方性氟中毒可以抑制Cu/Zn-SOD的mRNA的表達，減少Cu/Zn-SOD蛋白的產(chǎn)生，降低患者機體的抗氧化能力，提示了氟可能從分子