燃煤型氟中毒對大鼠睪丸組織的氧化應(yīng)激損傷及iNOS蛋白表達的影響.pdf

1、目的：通過建立燃煤型氟中毒大鼠模型,檢測燃煤型氟中毒大鼠睪丸組織氧化應(yīng)激水平、生精細胞凋亡率及iNOS蛋白表達變化,研究燃煤型氟中毒對大鼠睪丸組織的氧化應(yīng)激損傷以及iNOS蛋白表達的影響,探討燃煤型氟中毒對睪丸的生殖損傷機制。
　　方法：(1)動物模型的建立及處理:將40只雄性SD大鼠隨機分為對照組、低氟組、中氟組、高氟組4組,每組10只,各染毒組大鼠分別喂飼由病區(qū)含氟玉米配制的飼料,觀察大鼠牙齒變化并對大鼠氟斑牙進行分度,氟離子

2、選擇電極法檢測大鼠尿氟含量,分別于染氟120、180d分批處死,各時點每組處死大鼠數(shù)為5只。(2)采用HE染色光鏡下觀察睪丸組織病理學改變。(3)制備睪丸組織勻漿,檢測睪丸組織中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、總一氧化氮合酶(T-NOS)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性。(4)原位缺口末端標記(TUNEL)染色,觀察生精細胞凋亡的情況。(5)免疫組織化學染色SP法觀察誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表達的變化。

3、r>　　結(jié)果：(1)各染氟組大鼠均出現(xiàn)不同程度的氟斑牙,而對照組大鼠牙齒正常,同時各染氟組大鼠尿氟含量較對照組均明顯升高(P均<0.01),證明成功建立大鼠氟中毒模型。(2)各染氟組大鼠睪丸生精小管均發(fā)生不同程度的損害。(3)120d和180d時,各染氟組大鼠睪丸組織T-NOS、iNOS活性和MDA含量均明顯升高(P<0.05或P<0.01),且隨染氟劑量增加而升高;120d和180d時,各染氟組大鼠睪丸SOD活性較對照組明顯降低(P<

4、0.05或P<0.01)。(4)各染氟組單位生精小管細胞凋亡指數(shù)(AI)明顯高于對照組(P<0.05或0.01);同一時間階段,各染氟組生精細胞凋亡指數(shù)隨染氟劑量的增加呈升高趨勢,且各染氟組間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);相同染氟劑量下,生精細胞凋亡指數(shù)隨染氟時間的延長而增加(P<0.05)。(5)各染氟組iNOS的表達量高于對照組(P<0.05或0.01);同一染氟時間點,各染氟組睪丸細胞iNOS的表達量隨染氟劑量的增加(P<0