黃酮類活性成分與血清白蛋白相互作用的研究.pdf

1、本論文運用熒光猝滅光譜、紫外-吸收可見光譜、紅外光譜等多光譜分析手段,從分子水平上研究了四種結構相近的黃酮類小分子與牛血清白蛋白(BSA)在模擬生理條件下的相互作用.通過對結合作用過程各結合參數(shù)的研究討論,對比了不同黃酮與BSA結合作用的光譜特征,對黃酮類活性成分在體內(nèi)運輸與代謝、藥物分子設計和功能性食品研發(fā)等有重要意義.
　　本論文共分為以下四部分:
　　1.第一章綜述了血清白蛋白的分子結構、植物黃酮的分類和主要生理功能、

2、大分子與小分子結合的相關背景知識和常用研究方法,并介紹了目前該領域的研究進展和一些尚待解決的問題.
　　2.第二章討論了實驗操作方式對大分子與小分子結合熒光猝滅體系的影響,并研究了模擬生理環(huán)境下槲皮素與BSA相互作用的光譜特征.求得了不同溫度下的猝滅常數(shù)和結合常數(shù),證明在本實驗條件下,槲皮素與BSA的相互作用為單一的靜態(tài)猝滅.求得槲皮素在BSA上結合位置與212位色氨酸的結合距離為1.783 nm.由求得的熱力學參數(shù),證明槲皮素與

3、BSA之間的主導作用力為靜電引力.同步熒光光譜和紅外光譜結果分別表明槲皮素對BSA的二級結構有一定影響.金屬離子實驗結果表明,對于不同結合參數(shù),不同金屬離子的影響程度是不同的.
　　3.第三章通過紫外-可見吸收光譜、熒光猝滅法、同步熒光法和紅外光譜法研究了木犀草素、橙皮素和牛血清白蛋白的結合作用過程.根據(jù)實驗結果,初步判斷木犀草素與牛血清白蛋白的作用屬于動態(tài)猝滅和靜態(tài)猝滅并存的混合猝滅,橙皮素與與牛血清白蛋白的作用屬于動態(tài)猝滅,且

4、木犀草素對牛血清白蛋白的內(nèi)源熒光的猝滅程度明顯高于橙皮素.熱力學參數(shù)計算結果表明,橙皮素、木犀草素和BSA之間都存在靜電引力.同步熒光光譜實驗結果表明木犀草素和橙皮素與 BSA結合的位點可能在色氨酸殘基附近.紫外-可見吸收光譜結果表明 BSA可以與木犀草素、橙皮素發(fā)生相互作用,且對BSA結構改變情況不同,紅外光譜結果進一步說明木犀草素、橙皮素對BSA二級結構產(chǎn)生了不同影響.
　　4.第四章研究了生理濃度下Ca2+,K+,Cu2+,

5、Mg2+,Fe3+這5種金屬離子對芹菜素-BSA體系Ksv，Ka和n的影響,發(fā)現(xiàn)Mg2+影響最大.選擇pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度為單因素,研究了在實驗水平范圍內(nèi)Ksv、Ka和n的值與pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度的關系.通過響應面法實驗,得到了Ksv、Ka和n與pH值、NaCl濃度、Mg2+濃度的多元二次回歸方程.在實驗研究的因素水平范圍內(nèi),通過響應面分析得出:對于Ksv、Ka的值,NaCl濃度的影響最大;對于n值,pH值的