鼻咽癌細胞系5-8F與6-10B總蛋白質與分泌蛋白質的差異蛋白質組學研究.pdf

1、鼻咽癌(NPC)是一種好發(fā)于東南亞地區(qū)及我國南方各省的常見惡性腫瘤。早期轉移是NPC的顯著特征之一和患者死亡的主要原因，而且NPC放療后局部殘灶復發(fā)、遠處轉移亦是制約其療效和預后的瓶頸。因此，研究NPC的轉移機制、尋找預測轉移的分子標志物對NPC療效和預后起關鍵作用，具有重要的理論和臨床應用價值。 本研究以一對來自同一親本、具有不同轉移潛能的NPC細胞系5-8F和6-10B為轉移模型，應用雙向凝膠電泳(2-DE)技術分離5-8F

2、和6-10B細胞的總蛋白和分泌蛋白質；利用PDQuest圖像分析軟件比較兩株細胞總蛋白和分泌蛋白質2-DE圖譜的異同；應用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)和電噴霧-四極桿-飛行時間串聯(lián)質譜(ESI-Q-TOF MS/MS)鑒定差異表達的蛋白質，并利用生物信息學資源對所鑒定蛋白質的功能和亞細胞定位進行分析。然后采用Western blot驗證部分差異蛋白質在5-8F和6-10B細胞中的表達水平，采用免疫組化染色

3、檢測差異蛋白質nm23-H1在NPC組織和頸淋巴結轉移NPC中的表達。主要結果如下： 1.建立了高轉移NPC細胞系5-8F和無轉移潛能的NPC細胞系6-10B細胞總蛋白和分泌蛋白質的2-DE圖譜，識別了123個差異表達的蛋白質點，鑒定出29個非冗余的差異表達的蛋白質，并對這些蛋白質進行了功能分類和亞細胞定位； 2.Western blot分析結果顯示：差異蛋白質Annexin A1、Stratifin、Keratin-8

4、和nm23-H1在5-8F和6-10B細胞中的差異表達水平與比較蛋白質組學研究結果一致； 3.nm23-H1在高轉移的5-8F NPC細胞總蛋白中的表達水平高于無轉移潛能的6-10B細胞，在頸淋巴結轉移NPC中的表達水平亦高于原發(fā)NPC； 4、差異蛋白質肽基脯氨酰順反異構酶A(PPIA)存在乙?；⒐习彼峄蛘弑饺樗峄揎棥?本研究鑒定了29個可能與NPC轉移相關的蛋白質，發(fā)現(xiàn)nm23-H1可能具有促進NPC轉移