LCM結(jié)合定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選胃癌組織差異表達(dá)蛋白質(zhì).pdf

1、目的:胃癌是一種多基因參與多階段侵襲性疾病,胃癌的治療早期診斷是關(guān)鍵,因此,胃癌早期發(fā)現(xiàn)尤顯重要,本研究擬通過比較分析胃癌與正常胃粘膜組織間差異表達(dá)蛋白質(zhì)譜,篩選與鑒定出具有重要意義的差異表達(dá)蛋白質(zhì)分子,為尋找胃癌早期診斷及治療的分子標(biāo)志物提供初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:本研究應(yīng)用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection,LCM)技術(shù),獲取高純度的胃癌組織與正常胃粘膜的腺體組織,通過同位素iTR

2、AQ標(biāo)記胃癌與正常胃粘膜組織總蛋白,然后用強(qiáng)陽離子交換/反相液相色譜(SCX/nanoHPLC)進(jìn)行電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜分析(ESI-MS/MS),獲得兩組樣本的多肽及相對豐度信息,通過數(shù)據(jù)庫搜索與比對,鑒定差異表達(dá)蛋白質(zhì)。
　　結(jié)果:本研究通過定量蛋白組學(xué)的方法,比較胃低分化腺癌癌性腺體及正常胃黏膜腺體細(xì)胞間蛋白質(zhì)差異,共鑒定出319個(gè)蛋白質(zhì),其中表達(dá)差異在2倍以上的88個(gè),在胃癌中呈高表達(dá)的12個(gè)、呈低表達(dá)的76個(gè)。按蛋白質(zhì)功能分為

3、七大類:細(xì)胞骨架蛋白、分子伴侶、信號(hào)傳導(dǎo)、生物代謝、凋亡,蛋白質(zhì)合成與代謝類及其他蛋白質(zhì)。12種高表達(dá)的蛋白質(zhì)分別是細(xì)胞骨架蛋白和分泌蛋白比如vimentin、CK18、Decorin、Lumican等,低表達(dá)的76種蛋白質(zhì)中,有與信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)蛋白如Septin9、Ras-related protein Rab-44、S100P等,有與生物氧化相關(guān)蛋白如Peroxiredoxins-1、Cytochrome c oxidase subu

4、nit5B等,有與蛋白合成相關(guān)蛋白如60S ribosomal protein L8、Histone H1x等,有細(xì)胞骨架蛋白如CK19、Cofilin-1等,有與調(diào)亡相關(guān)蛋白如 Microtubule-associated protein1S、Protein-glutamine gamma glutamyltransferase2等,有與分子伴侶相關(guān)蛋白如HSP60、HSP70、HSP90β。胃癌組織中上述蛋白質(zhì)的表達(dá)改變,可能參與了