性激素對(duì)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響.pdf

1、目的： (1)原代培養(yǎng)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。 (2)觀察離體狀態(tài)下人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖和分化的過(guò)程。 (3)觀察性激素對(duì)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響。 方法： (1)膠原酶消化法原代分離培養(yǎng)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞。 (2)觀察原代培養(yǎng)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖和分化過(guò)程：以四甲基偶氮唑鹽(MTT)法觀察離體狀態(tài)下人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖狀態(tài)并繪制曲線；油紅O染色法觀察離體狀態(tài)下人大網(wǎng)

2、膜前脂肪細(xì)胞分化狀態(tài)并繪制曲線。 (3)觀察性激素對(duì)大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響：以四甲基偶氮唑鹽(MTT)方法檢測(cè)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞增殖的變化，以油紅O染色檢測(cè)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞分化的變化。 (4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用SPSS13.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： (1)成功地原代培養(yǎng)了人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞。 培養(yǎng)出的梭形細(xì)胞成分均一，增殖

3、旺盛，分化率高。經(jīng)形態(tài)學(xué)動(dòng)態(tài)變化的觀察、生長(zhǎng)曲線及油紅O脂肪染色抽取法測(cè)定，證明是功能活躍的前脂肪細(xì)胞。 (2)雌二醇對(duì)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，對(duì)分化過(guò)程中的脂肪積聚有抑制作用。睪酮對(duì)人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞的增殖無(wú)明顯作用，抑制人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞分化。 結(jié)論： (1)使用膠原酶消化的方法分離并原代培養(yǎng)了人大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞，為研究各種細(xì)胞因子或激素對(duì)大網(wǎng)膜前脂肪細(xì)胞的增殖或分化的作用提供了實(shí)驗(yàn)細(xì)胞模型。