生脈注射液對(duì)燒傷“休克心”防治作用及其機(jī)理研究.pdf

1、背景與目的： 自80年代以來(lái)，本課題組通過(guò)系列研究，發(fā)現(xiàn)并肯定了嚴(yán)重?zé)齻缙诩创嬖谛募p害，心臟自身的RAS系統(tǒng)激活是早期心肌缺血缺氧的重要始動(dòng)因素。由于心臟是循環(huán)的動(dòng)力器官，嚴(yán)重?zé)齻蠹丛?在因毛細(xì)血管通透性增加導(dǎo)致有效循環(huán)血容量顯著減少之前)出現(xiàn)的心肌損害及心臟泵血功能減弱，不僅引起心功能不全，還可誘發(fā)或加重休克，成為燒傷早期缺血缺氧的重要啟動(dòng)因素之一。根據(jù)這一認(rèn)識(shí)，提出了燒傷早期缺血缺氧損害的“休克心”假說(shuō)。因此，開(kāi)展對(duì)燒

2、傷后心肌損害的防治研究具有極其重要的理論與臨床意義。本課題旨在觀察生脈注射液對(duì)燒傷后“休克心”的防治作用，并初步探討其機(jī)理，為臨床防治燒傷后“休克心”提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料與方法： 1.前瞻性臨床研究制定納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)選我科自2005年1月至10月共20例嚴(yán)重?zé)齻颊撸慈朐合群箜樞蜻M(jìn)行完全隨機(jī)化分組，一組處理為常規(guī)臨床處理，不使用生脈注射液的對(duì)照組(n=10)；另一組為在臨床常規(guī)處理的基礎(chǔ)上，給予生脈注射

3、液的用藥組(n=10)。兩組分別在燒傷后12、24、48h和3、4、5d時(shí)相點(diǎn)采靜脈血標(biāo)本，送檢驗(yàn)科對(duì)血清中cTnI、CK-MB和LDH進(jìn)行檢測(cè)，收集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究 (1)心肌舒縮功能變化研究：健康SD大鼠54只，體重(210±20)g，雌雄不拘，隨機(jī)分為3組：正常組(N組，n=6)，不做處理，觀察正常大鼠左心室心肌舒縮功能的變化；單純燙傷組(B組，n=24)，按本所常規(guī)方法制備30％TBSAII

4、I度燙傷(病理切片證實(shí))，燙傷后按Parkland公式(4ml·Kg-1·1％TBSA-1·24h-1)腹腔注射乳酸林格氏液進(jìn)行液體復(fù)蘇；生脈注射液治療組(S組，n=24)，模型制備同B組，于燙傷后即刻給予4ml·Kg-1生脈注射液腹腔注射。多導(dǎo)生理監(jiān)測(cè)記錄儀檢測(cè)左心室收縮峰壓(LVSP)、左心室舒張末壓(LVEDP)和左心室等容收縮期中心室內(nèi)壓上升/下降的最大速率(±dp/dtmax)等指標(biāo)。 (2)防治“休克心”機(jī)理的研究7

5、2只SD大鼠隨機(jī)等分為二組：分組和處理同心肌舒縮功能變化研究。分別于燙傷前及燙傷后1、3、6、12和24小時(shí)6個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死大鼠采集腹主動(dòng)脈血?？鼓蛛x血漿后于-20℃凍存待測(cè)。無(wú)菌留取心肌組織液氮凍存待檢。心肌組織切片，光鏡下觀察心肌組織病理形態(tài)改變；硫代巴比妥酸法比色法檢測(cè)心肌組織勻漿液MDA、心肌組織caspase-3活性采用熒光測(cè)定法，心肌細(xì)胞凋亡檢測(cè)采用TUNEL法。 結(jié)果： 1.前瞻性臨床研究結(jié)果 1)

6、血清cTnI檢測(cè)結(jié)果燒傷后12h，對(duì)照組(n=10)和用藥組(n=10)兩組患者cTnI均達(dá)最高值，其均值比正常值(筆者單位正常參考值為0.00～0.04μg/L)上限分別高出14.6倍和6.8倍(P＜0.01)。其后均呈逐漸下降趨勢(shì)，于傷后5天基本接近正常值范圍。傷后12h，24h，48h，用藥組cTnI顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。 2)血清CK-MB和LDH檢測(cè)結(jié)果燒傷后12h，兩組患者在血清CK-MB(LDH)分別達(dá)各

7、組最高值，其均值比正常值[我院正常人血清CK-MB(LDH)參考值范圍為0～251U/L(1.9～4.0μmol·s-1·L-1)]上限分別高出2.1(1.5)倍和3.6(2.1)倍(P＜0.01)。其后呈下降趨勢(shì)，于傷后第4、5天降至正常范圍。但燒傷后前3天內(nèi)用藥組均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。 2.心肌力學(xué)變化的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果傷后12小時(shí)內(nèi)，對(duì)照組左室收縮峰壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升(下降

8、)速率(±dp/dtmax)等心肌力學(xué)指標(biāo)均呈進(jìn)行性下降，傷后24小時(shí)有所上升，但仍低于正常水平。而用藥組上述各項(xiàng)力學(xué)指標(biāo)均顯著改善(P＜0.01)，心肌病理形態(tài)學(xué)變化減輕，表明生脈注射液具有明顯改善嚴(yán)重?zé)齻笫笮募×W(xué)和減輕心肌損害的作用。 3.防治“休克心”機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果 (1)心肌細(xì)胞凋亡：TUNEL檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡，正常細(xì)胞核呈淡藍(lán)色，凋亡陽(yáng)性細(xì)胞表現(xiàn)為核呈深棕黃或棕褐色，形態(tài)較清晰、完整。兩組大鼠燙傷前(正

9、常組)心肌未見(jiàn)凋亡陽(yáng)性細(xì)胞，傷后3h可檢測(cè)到少量凋亡心肌細(xì)胞，傷后6、12h凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多，至24h仍較明顯。傷后3、6、12、24h，用藥組較對(duì)照組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均有所減少，6-24h明顯減少。傷后6、12、24h，兩組凋亡指數(shù)比較有非常顯著差異(P＜0.01)。 (2)caspase-3活性：兩組caspase-3活性于傷后3、6h邊峰值；傷后3、6、12h用藥組較對(duì)照組左心室心肌組織caspase-3活性顯著降低(P＜0.

10、05)。 (3)MDA含量：與燙傷前比較，對(duì)照組MDA于燒傷后3小時(shí)開(kāi)始升高(p＜0.05)，分別在6h、12h達(dá)高峰并持續(xù)在高水平，至24h才開(kāi)始下降，但仍顯著高于傷前(p＜0.05)。燙傷后3h、6h，用藥組MDA含量與傷前比較無(wú)顯著差異(p＞0.05)，12h及24h明顯高于燙傷前水平(p＜0.05或p＜0.01)，但顯著低于對(duì)照組水平(p＜0.01)。 討論與結(jié)論： 1、臨床前瞻性研究與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均表明，嚴(yán)

11、重?zé)齻缙谛募〕霈F(xiàn)了不同程度的病理性損害，表現(xiàn)出血清中cTnI、CK-MB、LDH等指標(biāo)的顯著升高，心肌力學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的顯著降低。生脈注射液能夠明顯減輕燒傷后心肌損害，改善cTnI、CK-MB、LDH和心肌力學(xué)等各項(xiàng)指標(biāo)，有效地防治燒傷后“休克心”。為燒傷早期“休克心”的防治，特別是燒傷后心肌的外源性保護(hù)提供了新的思路和方法。 2、根掘本研究的結(jié)果，生脈注射液對(duì)燒傷后心肌保護(hù)作用的機(jī)制可能通過(guò)降低嚴(yán)重?zé)齻缙谛募〗M織caspase