亞硒酸鈉對糖尿病腎病大鼠腎臟保護作用機制研究.pdf

1、隨著人們生活水平的提高和生活模式的改變，糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生率逐年上升，糖尿病腎病（DN）是糖尿?。―M）微血管并發(fā)癥之一，近年來發(fā)病率逐年升高，已成為終末期腎?。‥SRD）的首位病因，同時也是DM的嚴重并發(fā)癥和主要死亡原因之一。一旦出現(xiàn)持續(xù)蛋白尿，則病情不可逆轉，最終發(fā)展成終末期腎衰竭，只能靠透析和替代治療維持生命。所以早期干預，阻止或延緩糖尿病腎病病程進展，極為必要。 硒是機體必需的微量元素之一，是谷胱甘肽過氧化物酶必需的結

2、構成分，谷胱甘肽過氧化物酶的主要功能是清除體內過氧化物，維持膜系統(tǒng)的完整性。近年來研究發(fā)現(xiàn)硒具有降低血糖和調控胰島素介導的代謝過程等擬胰島素作用。對糖尿病鼠補充硒不僅可預防氧化應激，而且也可防止腎臟損傷，同時能改善葡萄糖內環(huán)境和增強外周組織對胰島素的敏感性。但硒在防治糖尿病腎病中的作用及機制，國內外報道甚少，所以其在糖尿病腎病中的防治效果和相關分子機制值得進一步探討。 第一部分亞硒酸鈉對糖尿病腎病大鼠基本狀況和腎臟病變的干預作用

3、 目的：通過鏈尿佐菌素法及長期高脂飲食誘導構建糖尿病腎病模型，并長期給予亞硒酸鈉口服治療，探討硒對糖尿病腎病大鼠基本狀況的改善和腎臟病變的延緩作用，評價硒防治糖尿病腎病的效果。 方法：以鏈尿佐菌素55mg/kg體重劑量一次性腹腔注射及長期高脂飲食喂養(yǎng)構建糖尿病腎病模型，試驗設空白組（N）、糖尿病對照組（DM）和亞硒酸鈉干預組（DM-Se），干預組給予亞硒酸鈉治療。各組大鼠分籠喂養(yǎng)，實驗期間自由進食、進水，自然照明，室溫2

4、0℃-28℃，均不給與胰島素和降糖藥。喂養(yǎng)10周后，觀察各組大鼠全身基本狀況。用代謝籠準確收集24小時尿量，用試劑盒檢測尿24小時白蛋白和尿肌酐。處死大鼠，腹主動脈取血清，測定血肌酐、血糖等指標。取雙腎，去除腎包膜，用冷生理鹽水灌洗，同時觀察腎臟大小、顏色、質地，稱雙腎重量。快速切取小塊腎皮質組織，4％戊二醛固定，制電鏡切片掃描電鏡觀察超微結構。切取腎臟組織，4％多聚甲醛固定，制石蠟切片HE染色光鏡下觀察病理改變。所有數(shù)據(jù)用SPSS11

5、.0軟件包分析統(tǒng)計學意義。 結果： 1.藥物干預組大鼠較模型對照組全身基本狀況明顯改善，血糖、腎重/體重比值無明顯變化，而血肌酐、尿24小時白蛋白等指標明顯改善。 2.干預組大鼠腎臟光鏡下組織形態(tài)病理變化和電鏡下超微結構均較模型對照組明顯改善。 結論： 1.亞硒酸鈉能顯著改善糖尿病腎病大鼠的全身狀況。 2.亞硒酸鈉能延緩糖尿病腎病大鼠的腎臟病變。 第二部分亞硒酸鈉對糖尿病腎病大鼠腎

6、臟p38MAPK、nephrin、adiponectin表達的影響 目的：通過鏈尿佐菌素法及長期高脂飲食誘導構建糖尿病腎病模型，并長期給予亞硒酸鈉口服治療，探討硒對糖尿病腎病大鼠腎臟p38MAPK、nephrin、adiponectin表達的影響，從而研究硒在防治糖尿病腎病中的作用機制。 方法：以鏈尿佐菌素55mg/kg體重劑量一次性腹腔注射及長期給予高脂飲食喂養(yǎng)構建糖尿病腎病模型，試驗設空白組（N）、糖尿病對照組（DM

7、）和亞硒酸鈉干預組（DM-Se），干預組給予亞硒酸鈉治療。各組大鼠分籠喂養(yǎng)，實驗期間自由進食、進水，自然照明，室溫20℃-28℃，均不給與胰島素和降糖藥。喂養(yǎng)10周后，處死大鼠，取雙腎，去除腎包膜，用冷生理鹽水灌洗，同時觀察腎臟大小、顏色、質地，稱雙腎重量。切取腎臟組織，4％多聚甲醛固定，制石蠟切片免疫組化分析p38MAPK、nephrin、adiponectin蛋白表達。切取雙腎組織投入液氮凍存，組織勻漿提取總RNA和總蛋白分別用PC

8、R法和Western blotting法分析p38MAPK、nephrin、adiponectin mRNA表達和蛋白表達。相關軟件分析圖片，獲得數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件包分析統(tǒng)計學意義。 結果： 1、干預組p38 MAPK mRNA及蛋白表達均較模型對照組降低，但較空白組高。 2、干預組nephrin mRNA及蛋白表達均較模型對照組增加，但較空白組低。 3、干預組adiponectin m