白質(zhì)消融性白質(zhì)腦病臨床與EIF2B基因突變研究.pdf

1、白質(zhì)消融性白質(zhì)腦病(Leukoencephalopathy with vanishing white matter，VWM)又稱(chēng)兒童共濟(jì)失調(diào)伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘化不良(childhood ataxia with central nervous systemhypomyelination，CACH)(OMIM 603896)是一種常染色體隱性遺傳的腦白質(zhì)病，典型的臨床表現(xiàn)為緩慢進(jìn)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性變，運(yùn)動(dòng)倒退重于智力倒退，可伴共濟(jì)失調(diào)，痙攣

2、性肢體運(yùn)動(dòng)障礙，個(gè)別病人可有不同程度的視神經(jīng)萎縮及癲癇。根據(jù)發(fā)病年齡可分為先天型、嬰兒型、早期兒童型、晚期兒童型及成人型共5型。其中最常見(jiàn)的是早期兒童型，也即經(jīng)典型。該病的頭顱核磁(MRI)有區(qū)別于其它白質(zhì)腦病的特異表現(xiàn)：彌漫對(duì)稱(chēng)的白質(zhì)異常信號(hào)，T1、T2及Flair像上異常白質(zhì)信號(hào)特點(diǎn)接近腦脊液信號(hào)，提示這部分大腦白質(zhì)已經(jīng)發(fā)生了液化，也是其特異性表現(xiàn)。該病是目前人類(lèi)遺傳性疾病中第一個(gè)確定由于mRNA翻譯啟動(dòng)異常導(dǎo)致的遺傳性疾病。200

3、1～2002年發(fā)現(xiàn)其致病基因是由于編碼真核細(xì)胞翻譯啟動(dòng)因子2B(Eukaryotic translation initiation factor 2B,EIF2B)五個(gè)亞單位(EIF2Ba-ε)的相應(yīng)編碼基因(EIF2B1-5)之一突變所致。根據(jù)收集病例的基因檢測(cè)結(jié)果，國(guó)外認(rèn)為各基因突變所占比例由大到小依次是EIF2B5、EIF2B4、EIF2B2、EIF2B3和EIF2B1。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)該病基因型與表型間無(wú)明確相關(guān)性，國(guó)內(nèi)尚沒(méi)有準(zhǔn)確的

4、發(fā)病率研究資料，北京大學(xué)第一醫(yī)院兒科于2006年報(bào)道了國(guó)內(nèi)首例VWM患者。 目的：對(duì)北京大學(xué)第一醫(yī)院兒科1年來(lái)收集的11例受試對(duì)象依照已報(bào)道突變所占比例的大小，依次進(jìn)行EIF2B1～5基因突變分析，為VWM患者的確診、遺傳咨詢(xún)及產(chǎn)前診斷提供依據(jù)，并為日后的功能研究奠定基礎(chǔ)。 方法：對(duì)11例(男7例，女4例)臨床診斷為VWM的患者的臨床表現(xiàn)、影像學(xué)特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室檢查進(jìn)行綜合分析。在知情同意的前提下采集5ml外周血提取DNA，

5、采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)EIF2B1～5基因，運(yùn)用DNA直接測(cè)序的方法進(jìn)行EIF2B1～5基因突變分析，明確基因突變類(lèi)型。此部分工作均在北京大學(xué)第一醫(yī)院兒科研究室完成(部分前期工作由課題組的其他研究生和老師完成，包括蔚洪恩、王慧芳、姚磊、吳曄等)。 結(jié)果： 1.臨床表現(xiàn)：11例患者中有10例出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體征，1例僅有MRI異常，起病年齡1歲4個(gè)月到6歲5個(gè)月，平均年齡3歲10個(gè)月，病前智力運(yùn)動(dòng)基本正常，多以運(yùn)

6、動(dòng)障礙起病，下肢重于上肢。病情加重前5例有發(fā)熱或上呼吸道感染史，4例有外傷史。4例病程中出現(xiàn)過(guò)驚厥史。1例家族史陽(yáng)性。10例有上運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病變體征，5例有小腦性共濟(jì)失調(diào)體征。 2.頭顱MRI：MRI共同表現(xiàn)為彌漫對(duì)稱(chēng)性腦室周?chē)肼褕A中心長(zhǎng)T1長(zhǎng)T2信號(hào)，可累及皮層下白質(zhì)，以額葉、頂葉白質(zhì)為主，F(xiàn)lair像上對(duì)稱(chēng)性白質(zhì)高信號(hào)，部分區(qū)域低信號(hào)，或者大部分白質(zhì)低信號(hào)僅存少量殘留高信號(hào)，其中4例胼胝體膝部或壓部有異常信號(hào)，1例胼胝體變

7、薄。2例腦橋被蓋部或腦干可見(jiàn)點(diǎn)狀長(zhǎng)T2信號(hào)。6例患者多次復(fù)查頭顱MRI，僅1例有進(jìn)展，其余沒(méi)有顯著變化。 3.實(shí)驗(yàn)室檢查：本組常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查及特殊實(shí)驗(yàn)室檢查，結(jié)果正常。 4.基因檢測(cè)結(jié)果：11例臨床診斷為VWM的患者，根據(jù)國(guó)外報(bào)道突變概率的大小，依次進(jìn)行了EIF2B5、EIF2B4、EIF2B2、EIF2B3、EIF2B1的檢測(cè)，在9例患者中發(fā)現(xiàn)了基因突變，其中4例患者的突變位于EIF283，其余5例突變均位于EIF285。3例

8、為純合突變，5例為復(fù)合雜合突變，1例僅找到一處突變。9例突變患者中共發(fā)現(xiàn)12種突變，其中包括5種沒(méi)有報(bào)道的錯(cuò)義突變：c.1126A＞G(p.N376D)，c.1004G＞C(p.C335S)，c.185A＞T(p.D62V)，c.140 G＞A(p.G47E)，c.1037 T＞C(p.I346T)。5種已知的錯(cuò)義突變：c.943 C＞T(p.R315C)，c.1340 C＞T(p.S447L)，c.674 G＞A(p.R225Q)，c

9、.1016 G＞C(p.R339P)，c.1157 G＞C(p.G386V)，一種沒(méi)有報(bào)道的無(wú)義突變，c.805 C＞T(p.R269X)，一種沒(méi)有報(bào)道的缺失突變c.1827_1838del(p.S610_D613del)。9例中純合突變3例，復(fù)合雜合突變5例，還有1例到目前為止僅找到一處雜合突變。在隨后的家系分析中，家系資料齊全的患者突變均來(lái)自父母雙方，父母均為表型正常的攜帶者，家系資料因種種原因缺少一方者，只能推測(cè)另一個(gè)突變來(lái)自缺少

10、方。2例患者沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明確的外顯子突變，國(guó)外的研究發(fā)現(xiàn)臨床診斷為VWM的患者，發(fā)現(xiàn)EIF2B1～5基因突變的概率有95％，另外5％可能與內(nèi)含子、5’非翻譯區(qū)及3’非翻譯區(qū)有關(guān)，這方面尚需要進(jìn)一步研究。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)首次在國(guó)內(nèi)建立了VWM的EIF2B1-5基因診斷方法，且首次在國(guó)內(nèi)從基因水平上確診了9例患者，發(fā)現(xiàn)了12種突變，這些突變來(lái)自父母雙方，父母均為表型正常的攜帶者。其中有7種突變是國(guó)內(nèi)外沒(méi)有報(bào)道的新突變。此研究結(jié)果為相關(guān)患者