肝細(xì)胞生長因子對(duì)大鼠供心保存的保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究肝細(xì)胞生長因子對(duì)大鼠供心長時(shí)間保存的保護(hù)作用并探討其可能作用機(jī)制。 方法:40只SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組：A組、B組和實(shí)驗(yàn)組：C組、D組，每組10只。健康SD大鼠開胸后迅速取出心臟，將心臟掛于Langendorff灌注裝置上，主動(dòng)脈根部灌注37℃、pH值7.4、經(jīng)95％的O<,2>及5％CO<,2>混合氣飽和的KH緩沖液。經(jīng)左心耳，左心房，左房室瓣將連有壓力傳感器的測壓管送入左心室,壓力傳感器與RM6240B多道生理信號(hào)

2、采集處理系統(tǒng)連接測定心室血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。10分鐘后關(guān)閉主動(dòng)脈灌注，開放左房灌注管，轉(zhuǎn)入Neely左心做功，收集冠脈流出液5分鐘。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別用HTK液和rh-HGF+HTK液作為心臟停跳液，待心臟停跳后，分別置于HTK保存液和rh-HGF+HTK保存液中，4℃分別保存8h(A組，C組)和12h(B組，D組)。于各時(shí)間段將心臟重新置于Langendorff裝置上灌注，灌注條件同保存前保持一致。通過檢測保存前后的血流動(dòng)力指標(biāo)的恢復(fù)率；

3、測定CSF，冠脈流出液中心肌酶CK、LDH，內(nèi)皮功能No、ET的變化；TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)AI：免疫組化檢測受體c-met的表達(dá)和RT-PCR法檢測心肌組織bcl-2mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果:各時(shí)間段與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)恢復(fù)較好，心肌病理損傷減輕；冠脈流出液中CK，LDH含量降低，No活性提高；ET活性降低；心肌組織中c-met表達(dá)升高：凋亡指數(shù)降低;心肌組織bcl-2 mRNA的表達(dá)升高。