肝細胞生長因子對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、肺移植已成為肺纖維化、原發(fā)性肺動脈高壓、肺氣腫、支氣管擴張等慢性終末期肺病的最有效治療措施，在肺移植中缺血再灌注所致肺損傷是移植失敗和早期肺移植患者死亡的主要原因，因而如何減輕缺血再灌注損傷已成為現(xiàn)階段研究的重要課題。缺血再灌注的病理生理過程中，氧自由基的快速大量產(chǎn)生及細胞間Ca2+積聚，這兩種情況均可導致細胞凋亡的發(fā)生。肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor HGF)具有很強的促進肺上皮細胞生長、抑制缺血-再

2、灌注誘導的肺上皮細胞凋亡作用，故我們運用HGF的抗凋亡活性，起到減輕肺缺血再灌注的損傷的作用。課題分為以下兩個部分： 第一部分：改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植動物模型 目的：探討建立更穩(wěn)定有效的大鼠原位左肺移植模型。 方法：將40只SD大鼠隨機配對，采用三袖套法建立大鼠肺移植模型。 結(jié)果：進行大鼠左肺原位移植正式實驗20例，手術(shù)平均時間(65±4)min。手術(shù)成功率85％。血氣、病理學等檢查證實成功復制

3、了肺移植缺血再灌注模型。 討論：該方法操作成功率高，經(jīng)濟實用，高度模仿臨床肺移植，可用于肺移植缺血再灌注損傷的實驗研究。 第二部分：肝細胞生長因子對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護作用 目的：通過建立大鼠肺移植缺血再灌注模型，探討肝細胞生長因子對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的影響及其作用機制。 方法：實驗分3組，即假手術(shù)對照組(A組)、空白對照組(B組)和HGF組(C組)，每組8例。B組用4℃LPDG液灌洗并保

4、存供肺4h，C組用含HGF(10ug/100ml)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h。移植肺再灌注2h后結(jié)束實驗。測定肺組織濕—干重比、MPO活性，觀察移植肺組織病理改變，ELISA測定TNF-α表達水平，免疫組化染色檢測c-met表達，RT-PCR檢測Bcl-2 mRNA的水平，TUNEL檢測細胞凋亡。 結(jié)果：與空白對照組比較，HGF組肺組織損傷程度明顯減輕，肺組織濕干重比、MPO活性、TNF-α均有下降(P<0.01)。c-