TLR(Toll-like receptor)4和9在肝癌和肝細(xì)胞系的表達(dá)及意義研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文TLR（Toll-like receptor）4和9在肝癌和肝細(xì)胞系的表達(dá)及意義研究姓名：劉旭東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：李剛20090518中文摘要表達(dá)T L R s 。T L R s 促效劑的免疫調(diào)節(jié)的特性用于腫瘤免疫治療時(shí)發(fā)現(xiàn)，T L R 的表達(dá)對(duì)于免疫系統(tǒng)的細(xì)胞的作用是不確定的，因此人們考慮可能與腫瘤細(xì)胞本身有關(guān)。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)T L R s 在多種腫瘤或腫瘤細(xì)胞系表達(dá)，如胃癌、結(jié)腸癌細(xì)胞系D

2、L D 和L o V o 、肝癌細(xì)胞系H e p G 2 上、乳腺癌細(xì)胞、黑色素瘤細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞、宮頸鱗狀細(xì)胞癌等，并且與腫瘤的生成、演變、以及侵襲等進(jìn)展有關(guān)?？偠灾?，T L R 表達(dá)在許多非免疫細(xì)胞和組織中，特別是上皮細(xì)胞，包括來(lái)源于腫瘤的上皮細(xì)胞。盡管T L R s 在不同腫瘤細(xì)胞上的特性不一樣，但是他們的功能已經(jīng)與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。T L R s 的表達(dá)也許促進(jìn)了上皮細(xì)胞的惡性化轉(zhuǎn)變、腫瘤的生長(zhǎng)、腫瘤的免疫逃避，并且誘導(dǎo)對(duì)凋亡

3、的抵抗和藥物抗性。為了闡明T L R s 和腫瘤細(xì)胞在功能上的相關(guān)性，而進(jìn)一步研究T L R s 在不同腫瘤上的表達(dá)的特性是很重要的。幽門(mén)螺桿菌( H P ) 在肝癌組織中被發(fā)現(xiàn)，它屬于G 一桿菌，細(xì)胞壁成份以脂多糖( L P S ) 為主，而L P S 是孔R(shí) 4 的配體；H B V 是引起人類(lèi)肝癌的主要病原體，其基因序列中非常多的C p G 序列，并且有證據(jù)表明H B VD N A 在血清中是以非甲基化的形式存在，而非甲基化C p

4、G D N A 是T L R 9 的配體。我們假說(shuō)由于T L R s的表達(dá)使這些微生物通過(guò)他們的成份對(duì)肝癌的形成和發(fā)展有影響，因此我們?cè)诩?xì)胞外研究這些受體在肝癌細(xì)胞系和肝細(xì)胞系的表達(dá)及意義。第一部分T L R 4 和T L R 9 在肝癌細(xì)胞系和肝細(xì)胞系的表達(dá)目的：研究T L R 4 和T L R 9 是否在肝細(xì)胞系和肝癌細(xì)胞系表達(dá)。方法：使用R T - P C R 和免疫組化染色，在基因水平和蛋白水平對(duì)肝癌細(xì)胞系H e p G 2 、

5、H u H 7 、H e p 3 B 、B c i - 7 4 0 2 、H e p G 2 ．2 ．1 5 ，及肝細(xì)胞系L - 0 2 及C h a n g l i v e r 進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果：在基因水平，T L R 4 在所有細(xì)胞系都有表達(dá)，而T L R 9 在H e p G 2 、H e p 3 B 、H u H 7 、L - 0 2 和C h a n g l i v e r 中有表達(dá)。在蛋白水平，T L R 4 同樣在所有細(xì)胞