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1、目的:觀察肝再生增強(qiáng)因子在新生和幼年大鼠(分別為一天齡,一周齡,三周齡和五周齡四個(gè)時(shí)間點(diǎn))的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺四個(gè)器官中在核酸水平和蛋白水平的表達(dá)情況。為進(jìn)一步探討肝再生增強(qiáng)因子的免疫抑制作用與母嬰傳播途徑引起的免疫耐受的關(guān)系提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:雄性Wistar大鼠24只,按4個(gè)年齡階段,分別是出生1天,7天,21天和35天分為四個(gè)組;每組6只。頸椎脫臼法處死大鼠;分別取其肝臟,脾臟,肌肉和胸腺四個(gè)器官分為兩部分放于液氮中
2、保存。其中一部份做RT-PCati測(cè)ALRmRNA水平,另一部份做Western印跡法檢測(cè)ALR蛋白水平。所有結(jié)果采用凝膠成像自動(dòng)分析系統(tǒng)處理,所得的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用單因素方差分析(One-WayANOVA)和q檢驗(yàn),P<0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.0l表示顯著性差異。所有資料應(yīng)用SPSSl0.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果:(1)PCR結(jié)果顯示:在未成年大鼠的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺均有ALR-mRNA
3、表達(dá)。在同一時(shí)間點(diǎn)上,ALR在肝臟中的表達(dá)量,比脾臟、肌肉和胸腺都高(P<0.01),肌肉在所有檢測(cè)器官中表達(dá)量最低。胸腺的表達(dá)量在前三個(gè)時(shí)間點(diǎn)上均明顯高于脾臟,但在5周齡時(shí)表達(dá)量降低,與脾臟的表達(dá)量已無差異。ALR在同一器官中的表達(dá)量,隨年齡的增加,ALR在各器官的表達(dá)量均逐漸降低。(2)westernblot結(jié)果顯示:在未成年大鼠的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺均有ALR蛋白表達(dá)。在同一時(shí)間點(diǎn)上,ALR在肝臟中的表達(dá)量,比脾臟、肌肉和胸腺都
4、高(P
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