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文檔簡介
1、目的:觀察肝再生增強因子在新生和幼年大鼠(分別為一天齡,一周齡,三周齡和五周齡四個時間點)的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺四個器官中在核酸水平和蛋白水平的表達情況。為進一步探討肝再生增強因子的免疫抑制作用與母嬰傳播途徑引起的免疫耐受的關系提供實驗依據。 方法:雄性Wistar大鼠24只,按4個年齡階段,分別是出生1天,7天,21天和35天分為四個組;每組6只。頸椎脫臼法處死大鼠;分別取其肝臟,脾臟,肌肉和胸腺四個器官分為兩部分放于液氮中
2、保存。其中一部份做RT-PCati測ALRmRNA水平,另一部份做Western印跡法檢測ALR蛋白水平。所有結果采用凝膠成像自動分析系統(tǒng)處理,所得的計量資料以均數±標準差(x±s)表示,采用單因素方差分析(One-WayANOVA)和q檢驗,P<0.05表示統(tǒng)計學差異,P<0.0l表示顯著性差異。所有資料應用SPSSl0.0統(tǒng)計軟件進行分析。 結果:(1)PCR結果顯示:在未成年大鼠的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺均有ALR-mRNA
3、表達。在同一時間點上,ALR在肝臟中的表達量,比脾臟、肌肉和胸腺都高(P<0.01),肌肉在所有檢測器官中表達量最低。胸腺的表達量在前三個時間點上均明顯高于脾臟,但在5周齡時表達量降低,與脾臟的表達量已無差異。ALR在同一器官中的表達量,隨年齡的增加,ALR在各器官的表達量均逐漸降低。(2)westernblot結果顯示:在未成年大鼠的肝臟,脾臟,肌肉,胸腺均有ALR蛋白表達。在同一時間點上,ALR在肝臟中的表達量,比脾臟、肌肉和胸腺都
4、高(P
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