BoLA-NC1在妊娠奶牛和新生牛中的差異表達研究.pdf

1、在人類和小鼠的實驗研究表明,主要組織相容性復合體(major histocompatibility complex,MHC)基因通過直接或間接免疫,影響配子品質(zhì)和胚胎發(fā)育。牛的MHC被命名為牛白細胞抗原(bovine leukocyte antigen,BoLA),根據(jù)MHC編碼蛋白類型的不同,BoLA基因又被分為Ⅰ類、Ⅱ類和Ⅲ類。妊娠過程從免疫學上來看類似于器官移植,母體免疫系統(tǒng)識別帶有父源抗原的胚胎并產(chǎn)生保護性免疫應答,直至胎兒娩出

2、。一旦母體-胎兒之間的相互作用失去平衡,就會造成病理性妊娠.同種半異體免疫排斥,如原因不明的流產(chǎn)。Ⅰ類蛋白分子保護胚胎免于母體的免疫系統(tǒng)的排斥反應在成功的妊娠建立和維持過程起著至關(guān)重要的作用,Ⅰ類蛋白分子在此起著至關(guān)緊要的作用。本文研究正常母牛在不同繁殖生理階段BoLA-Ⅰ類基因中BoLA-NC1基因的差異表達,對比青年未孕奶牛同基因的表達水平。研究其在奶牛不同繁殖生理階段的差異表達,有助于理解奶牛妊娠免疫建立和維持的方式。
　　

3、 試驗方法:分別取青年牛、懷孕第四周左右牛、懷孕中期牛、臨產(chǎn)前一周牛四個不同時期的血液樣本和新生仔牛的耳組織樣本以及胎盤組織樣本,提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,常規(guī)PCR克隆,測序驗證目的基因,進行RT-PCR熒光定量檢測。用比較CT值的相對定量法計算奶牛正常妊娠不同時期外周血液中性粒細胞(PMN)及新生胎兒耳組織和胎兒胎盤BOLA-NC1基因的表達含量。
　　 結(jié)果:BoLA-NC1在奶牛妊娠初期和后期的抗原水平表達量極顯著

4、高于未孕青年牛水平(P<0.01)；在孕中期表達與未孕青年牛水平相差不顯著(P>0.05)；在新生仔牛和胎盤中少表達(P<0.01)。
　　 結(jié)論:奶牛BoLA-Ⅰ類非經(jīng)典基因BoLA-NC1在正常妊娠中及新生仔牛的動態(tài)含量表達變化反映了母體免疫系統(tǒng)受到的調(diào)節(jié)。BoLA-NC1基因調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用,抑制針對胎兒的免疫排斥反應。該基因的表達與經(jīng)典的BoLA-Ⅰ類基因相對立,在奶牛不同妊娠階段的不同表達保障了奶牛妊娠的建立、維持