游離的LIF受體α亞基胞內(nèi)區(qū)遠(yuǎn)膜端對(duì)HL-60細(xì)胞增殖分化的影響.pdf

1、該研究首先成功篩選并建立了兩種白血病(HL-60)細(xì)胞株即pcDNA3.0-190CT3重組子白血病細(xì)胞株、pcDNA3.0空載體白血病細(xì)胞株,利用細(xì)胞計(jì)數(shù)、免疫組化、免疫沉淀、蛋白印跡、流式細(xì)胞儀等生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,從形態(tài)學(xué)、蛋白表達(dá)量、磷酸化水平等方面分析細(xì)胞形態(tài)變化、細(xì)胞增殖核抗原(PCNA)和CD15在三種細(xì)胞株中的表達(dá)情況及Stat3、P44/42 MAPK磷酸化水平,進(jìn)而分析190CT3是否可以替代LIF啟動(dòng)下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),進(jìn)

2、而抑制白血病細(xì)胞的增殖并促進(jìn)其分化;另一方面我們通過(guò)不同細(xì)胞株注射的裸鼠各器官的增生及淋巴細(xì)胞侵潤(rùn)情況的比較,分析不同細(xì)胞株的惡性程度,進(jìn)而分析在動(dòng)物體內(nèi)190CT3是否有抑制白血病細(xì)胞增殖的作用.結(jié)果表明:190CT3 cDNA可以在白血病HL-60細(xì)胞中表達(dá),并且在沒(méi)有LIF刺激的情況下,替代LIF,獨(dú)立開啟下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,激活Stat3和P42/44 MAPK等信號(hào)分子.通過(guò)PCNA的表達(dá)水平說(shuō)明了細(xì)胞的增殖情況,粒細(xì)胞表面標(biāo)

3、志CD15的表達(dá)水平說(shuō)明了白血病HL-60細(xì)胞向粒細(xì)胞系的分化情況.該研究結(jié)果表明:190CT3重組子可以在白血病HL-60細(xì)胞中表達(dá),且在沒(méi)有LIF刺激的情況下可以激活下游的信號(hào)分子,啟動(dòng)LIFR的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),抑制白血病HL-60細(xì)胞的增殖,促進(jìn)其分化.這同時(shí)也說(shuō)明,190CT3在啟動(dòng)白血病細(xì)胞LIFR的信號(hào)通路中發(fā)揮了重大作用.這也提示我們,可構(gòu)建190CT3分子代替LIF誘導(dǎo)白血病細(xì)胞生長(zhǎng)抑制,同時(shí)克服白血病細(xì)胞對(duì)LIF不敏感的不足