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1、目的:白血病細(xì)胞能夠通過自分泌方式分泌細(xì)胞因子而作用于自身,使細(xì)胞大量的增殖:白血病細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子也能作用于人臍帶血(UcB)單個(gè)核細(xì)胞(MNCs)中的CD34+/CD133+細(xì)胞亞群使之增殖。關(guān)于HL-60細(xì)胞(急性早幼粒白血病細(xì)胞)培養(yǎng)上清液能否使UCB-MNCs增殖尚未見報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)主要目的是觀察HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)人UCB-MNCs增殖分化的影響。 方法:實(shí)驗(yàn)分為①有HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液+stemSpan
2、(R)SFEM組;②StemSpan(R)SFEM組:③HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液+高糖(HG)-DMEM組:④HG-DMEM組;⑤HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液+低糖(LG)-DMEM組;⑥LG-DMEM組。收分離的人UCB-MNCs按2.5×106/瓶分別接種于6組培養(yǎng)液中,37℃,5%CO2,飽和濕度培養(yǎng),分別于第3,第6,第9,第12天計(jì)細(xì)胞總數(shù),于培養(yǎng)前和培養(yǎng)12天用流式細(xì)胞儀(FCM)分析表型CD34,CD90和CD1466的變化。
3、 結(jié)果:①培養(yǎng)至第3天,HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液+StemSpan(R)SFEM組和StemSpan(R)SFEM組MNCs數(shù)較培養(yǎng)前和其余各組明顯升高(均P<0.05),至第9天細(xì)胞數(shù)維持在較高水平:②HL-60細(xì)胞培養(yǎng)上清液+StemSpan(R)SFEM組和StemSpan(R)SFEM組各時(shí)點(diǎn)上,前者M(jìn)NCs數(shù)量較后者有所增加,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);③添加HL-60上清的高糖組和低糖組,各時(shí)點(diǎn)上的MNCs數(shù)均較
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