外源性超氧化物歧化酶拮抗6-OHDA誘導大鼠中腦多巴胺能神經元凋亡的實驗研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文外源性超氧化物歧化酶拮抗6OHDA誘導大鼠中腦多巴胺能神經元凋亡的實驗研究姓名：徐強申請學位級別：碩士專業(yè)：神經外科指導教師：徐如祥2001.5.1中文摘要l／卜，f帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)是一種與年齡相關的神經變性疾病，中老年人多見，主要是黑質紋狀體區(qū)的多巴胺(DA)能神經元的進行性變性和死亡。其主要的發(fā)病機制是氧化應激，線粒體功能不全，內源性毒素，神經營養(yǎng)因子保護作用F降，最終引

2、起多巴胺神經元的變性和死亡0由于多巴胺的氧化代謝產物H20：和別的氧反應性物質(ROS)在帕金森病發(fā)病過程中所起的重要作用，氧化應激備受關注。6OHDA誘導的偏側帕金森病模型鼠是研究帕金森病的常用動物模型，明確注入6OHDA腦區(qū)內的氧化應激狀態(tài)與神經元凋亡的關系，以及抗氧化物酶的活性是應用抗氧化物酶基因轉導治療帕金森病實驗研究的基礎和前提。／本實驗用健康成年雄性sD大鼠144只，隨機分九組，分別為正常組、對照組、損傷組、實驗對照組和實驗

3、A、B、C、D、E組。損傷組是在大鼠右側黑質區(qū)立體定向注射6OHDA(10垤／6m)；對照組是采用相同方法，以同等量的生理鹽水代替6OHDA向同～靶點注射；實驗組則是采用相同方法，在注入6OHDA的前1小時、同時、后1小時、7小時和12小時注入外源性SOD蛋白90IU／6p1于大鼠右側黑質區(qū)，分別為A、B、C、D、E組。實驗對照組是生理鹽水(6p1)與6OHDA(10垤／6肛1)同時注入大鼠右側黑質區(qū)。術后10天用阿撲嗎啡腹腔注射誘導大

4、鼠的旋轉行為。應用試劑盒檢測動物雙側中腦組織的總抗氧化能力、活性氧、TSOD和CuZn—SOD活性，以明確中腦內的氧化應激狀況。應用抗TH免疫組化染色法和TUNEL法觀察中腦黑質部位多巴胺能神經元和凋亡細胞，明確6OHDA致多巴胺能神經元凋亡和外源性SOD的拮抗作用。實驗結果：1行為學改變：術后lO天用05mg／kg阿撲嗎啡腹腔注射檢測各組大鼠的旋轉行為。實驗對照組、損傷大鼠旋轉圈數最多，平均轉速分別為187919圈／30min，166