人食管癌相關基因編碼蛋白質的表達、結構及其功能的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、食管癌的發(fā)生發(fā)展與多種癌基因、抑癌基因改變有關,但尚未發(fā)現與食管癌有高度相關的基因.為了探索新的食管癌相關基因,該室用mRNA差異顯示技術與5'-RCAE (Rapid Amplificaation of cDNA Ends)方法從正常人食管上皮與高癌家族的食管癌組織中分離與克隆出四個基因片段,序列同源比較未知新基因,并獲得了其中一個基因片段的全長cDNA序列,命名為食管癌相關基因-1 (Esophageal Cancer Relate

2、d Gene-1,ECRG-1).該論文旨在研究ECRG-1基因所編碼蛋白質的結構與功能.為此,研究人員從以下幾個方面進行了研究.1、ECRG-1基因編碼蛋白質的結構與功能分析及其三維結構的模建:應用生物信息學(Bioinfomatics)方法分析了ECRG-1基因編碼蛋白質的性質與結構,進行蛋白質同源序列比較,預測其功能并模建該蛋白質的三維結構.2、ECRG-1基因編碼蛋白質在原核細胞中的表達:應用RT-PCR方法克隆與分離出ECRG

3、-1基因的蛋白編碼區(qū)序列,經測序與5'-RCAE釣取的序列相符合.3、抗ECRG-1基因編碼蛋白抗體的制備:ECRG-1基因融合蛋白經透析復性及SDS-PAGE電泳純化,然后免疫BLAB/C小鼠,制備抗ECRG-1基因蛋白的多克隆抗體.4、ECRG-1基因在真核細胞中的表達:以pcDNA3為表達載體,構建ECRG-1真核表達載體pcDNA3-ECRG1,脂質體介導下轉染ECRG-1基因表達缺失的NEC細胞(亞硝胺誘導的人胎兒食管癌細胞,

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