人食管鱗癌癌前病變基因及相關(guān)蛋白表達變化的研究.pdf

1、食管癌是由食管的鱗狀上皮或腺狀上皮異常增生發(fā)展而來。食管癌的發(fā)生由多因素、多基因共同參與經(jīng)過多個階段（輕度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生以及浸潤癌）慢慢演化而來。在病理上食管癌主要分為食管鱗癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）和食管腺癌，而我國食管鱗癌患者的發(fā)病率和死亡率居世界首位。目前隨著分子生物學(xué)發(fā)展，食管鱗癌發(fā)生的分子機制備受關(guān)注。
　　在本文第一部分的研究中，我們

2、應(yīng)用表達譜芯片技術(shù)對10例ESCC組織、7例癌前病變組織及29例切緣及遠端正常組織的基因表達譜進行分析，得到ESCC及癌前病變組織中差異性表達基因333個，從中篩選出候選基因9個，并對其中的極光激酶基因(Aurora kinasesA，Aurora-A)進行研究。Aurora-A是一個潛在的癌基因，通過編碼一種在進化上保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，來參與調(diào)控細胞的有絲分裂過程和維持染色體組的完整性。我室于2004年首次發(fā)現(xiàn)了Aurora

3、-A與ESCC相關(guān)，并做了大量地研究工作，但Aurora-A在ESCC癌前病變階段的表達情況和作用方式尚未明確。
　　首先，我們應(yīng)用Real-time PCR實驗驗證了上述表達譜芯片結(jié)果，Aurora-A基因在6例癌前病變組織和3例ESCC組織中的表達程度高于其自身遠端正常組織，高表達的比率分別為75.0％(6/8)和60.0％(3/5)。與人食管上皮永生化細胞株相比，Aurora-A在ESCC細胞株中的表達水平明顯升高。說明Au

4、rora-A在ESCC及其癌前病變中存在高表達現(xiàn)象。然后，我們應(yīng)用組織芯片技術(shù)和免疫組織化學(xué)法(S-P法)檢測Aurora-A在9例重度不典型增生組織和122例ESCC組織以及它們的癌旁癌前病變組織中的表達情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Aurora-A在正常食管粘膜上皮組織、輕度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生以及ESCC組織中的陽性率分別為17.2％、27.6％、50.0％、77.9％和84.3％，其表達率隨病變嚴(yán)重程度而逐漸增加。Auro

5、ra-A蛋白表達水平與ESCC癌前病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（r=0.548，P＜0.001）。最后，通過體外實驗證實外源性過表達Aurora-A對人食管上皮永生化細胞的增殖能力以及遷移能力均有促進作用。所以我們的研究表明，Aurora-A在ESCC及其癌前病變中存在高表達，可能參與食管癌的發(fā)生與發(fā)展，并且可能為ESCC的早期診斷及治療提供新的方向。
　　本文第二部分研究ESCC及其癌前病變組織中Ninein樣蛋白(ninein lik

6、e protein， Nlp)的表達情況。Nlp是我室通過酵母雙雜交實驗篩選出來的能夠自行定位克隆的中心體蛋白，在多種腫瘤中存在表達，多項前期研究結(jié)果提示Nlp是一個潛在的癌基因。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)法聯(lián)合組織微陣列，檢測Nlp在10例重度不典型增生組織和133例ESCC組織以及它們的癌旁癌前病變組織中的表達情況，Nlp在正常食管粘膜上皮組織、輕度不典型增生、中度不典型增生、重度不典型增生及ESCC組織中的陽性率分別為11.0％、27.