rhBMP-2生物學(xué)活性及其復(fù)合異種骨體內(nèi)異位植入的成骨活性研究.pdf

1、目的:①研制具有誘導(dǎo)成骨活性的異種骨植骨材料②觀察基因重組人骨形成蛋白-2和異種骨復(fù)合體的成骨活性及其量效關(guān)系③研究rhBMP-2在體內(nèi)誘導(dǎo)成骨中Collagen Ⅰ、Ⅱ及堿性磷酸酶(ALP)的表達(dá).方法:以基因重組人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)與去抗原部分脫鈣牛松質(zhì)骨載體(DBCB)復(fù)合,制成復(fù)合rhBMP-2的異種骨(rhBMP-2/DBCB).動(dòng)物實(shí)驗(yàn)Ⅰ:將6周齡雄性BALB/C小鼠144只,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組A、B和對照組C Ⅰ

2、、CⅡ,于實(shí)驗(yàn)A組小鼠右股部肌袋內(nèi)植入rhBMP-2/DBCB1骨粒(含rhBMP-2 0.4mg),B組同樣部位植入rhBMP-2/DBCB2骨粒(含rhBMP-20.1mg),對照組C Ⅰ單純植入DBCB骨粒,對照組CⅡ單純植入rhBMP-2 0.1mg,分別于術(shù)后7、14及21d取材,通過大體觀察、X線影像學(xué)、組織學(xué)分析,ALP活性和鈣含量測定,觀察4組誘導(dǎo)成骨情況.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)Ⅱ:將含rhBMP-2 0.4mg的rhBMP-2/DB

3、CB1復(fù)合體植入BALB/C小鼠的右股部肌袋內(nèi),于術(shù)后3、5、7、9、11、14、17和21d 8個(gè)時(shí)間點(diǎn)取材,用免疫組化法對新生骨組織中Ⅰ、Ⅱ型膠原進(jìn)行檢測,對ALP活性進(jìn)行定量分析.結(jié)論:①rhBMP-2/DBCB是高效誘導(dǎo)成骨材料,經(jīng)處理的小牛松質(zhì)骨是良好的緩釋載體,提高了rhBMP-2的骨誘導(dǎo)能力.②復(fù)合rhBMP-2異種骨的成骨活性與rhBMP-2的含量成正比.③在體內(nèi)誘導(dǎo)成骨中rhBMP-2促進(jìn)了Collagen Ⅰ、Ⅱ及A