4-苯基丁酸抗胰島β細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激效應(yīng)的研究.pdf

1、糖尿病是由多種病因引起的以慢性高血糖為特征的代謝紊亂性疾病。其患病人數(shù)正隨著人民生活水平的提高、人口老化、生活方式的改變以及診斷技術(shù)的進步而迅速增加。糖尿病發(fā)病的機制尚未明確，其中胰島β細胞功能障礙是2型糖尿?。═2DM）發(fā)病的主要機制之一，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與胰島β細胞功能障礙的發(fā)生密切相關(guān)，由此尋求一種具有抵抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用，保護胰島β細胞功能免受損害的藥物顯得尤為必要。本文主要探討4-苯基丁酸（4-PBA）對鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的糖

2、尿病大鼠胰島β細胞及 RINm5F細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）的效應(yīng)。本研究通過高脂飲食喂養(yǎng)和小劑量腹腔注射STZ的方法建立SD大鼠 T2DM模型，造模成功后第10天給予4-PBA治療組大鼠500 mg·kg-1·d-14-PBA灌胃20天。放免法檢測各組大鼠游離脂肪酸（FFA）、血糖及胰島素的變化；HE染色觀察各組大鼠胰島形態(tài)學(xué)改變；QT-PCR方法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及細胞凋亡相關(guān)因子（GRP78，caspase3，CHOP） mRNA的表達

3、變化。同時，通過用4-PBA對棕櫚酸誘導(dǎo)發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的RINm5F胰島瘤細胞進行處理，利用QT-PCR及Western blotting方法在 mRNA及蛋白水平對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及細胞凋亡相關(guān)因子進行檢測，在細胞水平對4-PBA對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的效應(yīng)進行進一步的驗證。本研究發(fā)現(xiàn)， STZ注射10天后，模型組血糖高于正常組和高脂組（P<0.01），體重降低（P<0.01），符合糖尿病表現(xiàn)，表明 T2DM大鼠膜型制備成功。4-PBA治療20天后，

4、與T2DM組比較，4-PBA治療組大鼠血糖濃度降低（P<0.05），血清胰島素水平升高（P<0.05）。HE染色可見T2DM組大鼠胰島結(jié)構(gòu)紊亂，邊界與周圍組織分界不清，胰島細胞數(shù)量減少，而4-PBA治療組胰島結(jié)構(gòu)尚完整，且胰島細胞數(shù)量有所增加。QT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，與正常對照組相比，T2DM組大鼠GRP78， CHOP mRNA顯著上調(diào)（P<0.05），給予4-PBA治療后，這些因子的表達水平均下降（P<0.01）。在正常糖濃度下對細胞

5、進行處理時，棕櫚酸刺激組GRP78，CHOP，caspase-3的mRNA及蛋白表達水平均顯著高于正常對照組。用不同濃度4-PBA對RINm5F細胞進行處理后，10 mmol·L-14-PBA處理組CHOP，caspase-3的mRNA及蛋白表達水平較棕櫚酸刺激組顯著降低，2.5 mmol·L-1及5 mmol·L-14-PBA處理組兩種因子mRNA的表達水平顯著高于棕櫚酸刺激組，caspase3因子蛋白表達降低，CHOP表達升高。結(jié)合