內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激參與雙酚A導致的肝細胞凋亡.pdf

1、目的：雙酚 A(Bisphenol-A，BPA)是一種最常見的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)。近年來研究提示BPA與肝功能失調(diào)和肝臟疾病如肝臟脂質(zhì)沉積、代謝綜合征密切相關(guān)，而肝細胞凋亡異常是這些疾病發(fā)病機制之一。BPA是否通過影響肝細胞凋亡參與肝臟疾病的發(fā)生并不清楚，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激是否參與其中也尚未報道。本研究旨在探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激在BPA導致肝細胞凋亡中的作用。
　　方法：不同濃度BPA（0、0.01、10μmol/L）干預HepG2細胞，流式細胞

2、術(shù)檢測細胞凋亡率。另將48只雄性CD1小鼠隨機分成4組（12只/組），分別予以含不同濃度 BPA（0、5、50、500μg/(kg/d)）的標準飼料喂養(yǎng)8周后，利用HE染色觀察肝臟組織形態(tài)學改變、Hoechst33258染色觀察細胞凋亡情況，western blot法檢測肝臟組織中凋亡相關(guān)指標Cleaved Caspase3、Bax、Bcl-2的蛋白表達，采用分光光度法測定Caspase3酶活性。另外，Western blot法檢測內(nèi)質(zhì)

3、網(wǎng)應激相關(guān)標志物Bip、IRE1α、PERK、eIF2α和SREBP-1c等蛋白及其磷酸化的表達水平。
　　結(jié)果：相比對照組，BPA干預 HepG2細胞顯示細胞凋亡率明顯增多。與對照組相比，BPA各干預組小鼠肝臟組織中凋亡小體明顯增多，肝臟組織促凋亡基因Cleaved Caspase3與Bax蛋白表達增加，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），抗凋亡基因Bcl-2蛋白含量無明顯變化；Caspase3酶活性顯著增強（P<0.05）。BP