黃芪丹參組分藥對(duì)干預(yù)纖維化抑制因子PaR-3、HGF作用的量效關(guān)系研究.pdf

1、目的:通過觀察黃芪丹參組分（黃芪總皂苷、丹參總酚酸）藥對(duì)對(duì)腎纖維化抑制因子Par-3、HGF表達(dá)的影響，探討其對(duì)大鼠腎間質(zhì)纖維化的保護(hù)作用機(jī)制及量效關(guān)系。
　　 方法:將46只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組(n=8)、造模組(n=38)。造模組采用單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)建立腎間質(zhì)纖維化模型，造模后分為模型組(n=8)，黃芪丹參組分低劑量治療組（簡(jiǎn)稱:組分低劑量組，n=10），黃芪丹參組分中劑量治療組（簡(jiǎn)稱:組分中劑量組，n=1

2、0），黃芪丹參組分高劑量治療組（簡(jiǎn)稱:組分高劑量組，n=10）。于造模后第2天開始，各組給予相應(yīng)的干預(yù)措施治療14天，實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天收集24小時(shí)尿液，治療期滿后麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈采血，摘取右側(cè)腎組織并沿縱軸剖開，一半用4％的多聚甲醛固定，一半放置液氮保存。檢測(cè)大鼠血肌酐(Cr)、尿素(Urea)、24小時(shí)尿蛋白、α1微球蛋白(α1-MG)，觀察腎組織病理改變，并應(yīng)用免疫熒光觀察大鼠腎組織Par-3蛋白表達(dá)情況，Western blot方

3、法檢測(cè)大鼠腎組織Par-3、HGF蛋白的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:(1)各組大鼠腎組織HE染色結(jié)果正常組大鼠腎組織未見病理改變，模型組大鼠腎組織可見腎小管上皮細(xì)胞大量萎縮，管腔代償性擴(kuò)張，并可見腎間質(zhì)內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)纖維化明顯;組分低、中、高劑量組大鼠腎組織病理變化均有明顯改善，其中，組分中劑量組和組分高劑量組大鼠腎組織改善較組分低劑量組改善明顯（P＜0.05）;組分中劑量組和組分高劑量組間差異不明顯。
　　 (2

4、)腎功能測(cè)定結(jié)果UUO兩周后，模型組大鼠血清Cr和Urea水平顯著高于正常組(P＜0.05);經(jīng)治療后，組分低、中、高劑量組大鼠血清Urea水平明顯低于模型組(P＜0.05)，清Cr水平與模型組相比則無(wú)明顯變化;組分低、中、高劑量組大鼠血清Cr、Urea水平組間比較均無(wú)顯著差異性（P＞0.05）。
　　 (3)尿α1-MG檢測(cè)結(jié)果模型組大鼠尿α1-微球蛋白水平顯著高于正常組(P＜0.05);經(jīng)治療后，組分低、中、高劑量組大鼠尿α

5、1-微球蛋白水平明顯低于模型組(P＜0.05);組分低、中、高劑量組組間比較無(wú)顯著差異性(P＞0.05)。
　　 (4)24小時(shí)尿蛋白檢測(cè)結(jié)果 UUO兩周后，模型組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量顯著高于正常組（P＜0.05）;與模型組比較，組分低、中、高劑量組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量均顯著低于模型組（P＜0.05）;組分中劑量組和組分高劑量組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量均顯著低于組分低劑量組（P＜0.05）;組分中劑量組與組分高劑量組比較則差異

6、無(wú)顯著性(P＞0.05)。
　　 (5)免疫熒光檢測(cè)結(jié)果Par-3在模型組大鼠腎小管上皮細(xì)胞中呈現(xiàn)較弱熒光，為弱陽(yáng)性表達(dá);在正常組大鼠腎小管上皮細(xì)胞中呈現(xiàn)較強(qiáng)熒光，為強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，經(jīng)黃芪丹參組分藥對(duì)治療后，組分低、中、高劑量組大鼠腎小管上皮細(xì)胞Par-3熒光強(qiáng)度較模型組明顯增強(qiáng)，其中以組分低劑量組增強(qiáng)尤為明顯。
　　 (6)通過Western blot檢測(cè)結(jié)果模型組大鼠腎組織有極少量Par-3、HGF表達(dá);與模型組相比，正