黃芪丹參顆粒藥對(duì)干預(yù)腎纖維化Wnt-β-catenin信號(hào)通路的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)腎纖維化信號(hào)通路Wnt/β-catenin的影響，并初步探討其量效關(guān)系，為臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)。
　　 方法:采用40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組，即正常組，模型組，黃芪丹參顆粒(1∶
　　 1)藥對(duì)低劑量治療組（顆粒低劑量組），黃芪丹參顆粒(1∶1)藥對(duì)中劑量治療組（顆粒中劑量組），黃芪丹參顆粒(1∶1)藥對(duì)高劑量治療組（顆粒高劑量組）。除正常組外，其余大鼠均造成UUO模型，即麻醉后進(jìn)入腹腔結(jié)扎右

2、側(cè)輸尿管。正常組和模型組予雙蒸水灌胃，其余各治療組予相應(yīng)藥物灌胃治療十四天，.全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清肌酐(Cr)、尿素(Urea)、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cystatin C，Cys C)24小時(shí)尿蛋白定量(24hUP)，ELISA法檢測(cè)尿α1-微球蛋白(α1-Microglobulin，α1-MG)的含量，光鏡觀察腎組織病理、膠原沉積，免疫組化法檢測(cè)腎組織內(nèi)E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型膠原(ColⅠ)和α-平滑肌肌動(dòng)

3、蛋白(α-SMA)的變化，Western Blot技術(shù)檢測(cè)腎組織Wnt4和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)的表達(dá)。
　　 結(jié)果:1.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠腎臟病理的影響(1) HE染色結(jié)果正常組大鼠腎組織未見(jiàn)病理改變，UUO組大鼠腎組織可見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞大量萎縮空泡變性，管腔擴(kuò)張或斷裂，并可見(jiàn)腎間質(zhì)內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)纖維化較明顯;各治療組病理變化較模型組均有明顯改善，顆粒中、高劑量組HE評(píng)分較顆粒低劑量組明顯減少(

4、P＜0.05)。(2) Masson染色結(jié)果正常組腎組織膠原沉積不明顯，模型組可見(jiàn)腎小囊、腎小管基膜及間質(zhì)出現(xiàn)明顯的絲狀淡藍(lán)色膠原沉積，各治療組膠原沉積較模型組均明顯減輕。顆粒高劑量組Masson評(píng)分較顆粒低劑量組明顯減少(P＜0.05)。
　　 2.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠腎功能的影響模型組大鼠血清Cr和Urea水平顯著高于正常組，顆粒中劑量組血清Cr水平和各治療組Urea水平顯著低于模型組，顆粒高劑量組血Urea水平顯著

5、低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 3.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠24hUP和尿α1-MG的影響模型組24hUP和尿α1-MG均顯著高于正常組，各治療組24hUP和尿α1-MG顯著低于模型組，顆粒中、高劑量組24hUP均顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05);各治療組之間比較尿α1-MG差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。
　　 4.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠腎組織細(xì)胞因子的影響(1)黃芪丹參顆粒藥對(duì)可顯著升高各治療組

6、UUO大鼠腎組織E-cadherin的表達(dá)，顆粒中、高劑量組E-cadherin的表達(dá)均顯著高于顆粒低劑量組，顆粒高劑量組E-cadherin的表達(dá)顯著高于顆粒中劑量組(P＜0.05);(2)黃芪丹參顆粒藥對(duì)可顯著降低各治療組ColⅠ、α-SMA的表達(dá)，顆粒中劑量組α-SMA的表達(dá)顯著低于顆粒低劑量組，顆粒高劑量組ColⅠ、α-SMA的表達(dá)均顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 5.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠腎組織Wn

7、t4和β-catenin的影響模型組UUO大鼠腎組織Wnt4和β-catenin顯著高于正常組(P＜0.05)，黃芪丹參顆粒藥對(duì)可顯著降低各治療組Wnt4和顆粒中、高劑量組β-catenin的表達(dá)，顆粒中、高劑量組Wnt4的表達(dá)顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:1.黃芪丹參顆粒藥對(duì)對(duì)UUO大鼠腎臟具有一定的保護(hù)作用，一定程度改善腎功能及腎臟病理，其機(jī)制可能與其能促進(jìn)E-cadherin在UUO大鼠腎組織中的表達(dá)