1型糖尿病小鼠體內(nèi)樹突狀細(xì)胞亞群變化的初步研究.pdf

1、目的：
　　探討1型糖尿病（Type1 diabetes mellitus,T1DM）小鼠體內(nèi)樹突狀細(xì)胞(Dendritic cell,DC)及其亞群的變化規(guī)律，以期明確DC亞群在T1DM發(fā)病中的作用，豐富了以DC亞群為基礎(chǔ)的免疫治療的理論體系，為T1DM免疫細(xì)胞的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　應(yīng)用鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)構(gòu)建T1DM小鼠模型，在給予C57BL/6小鼠尾靜脈注射 ST

2、Z后第10天、30天和60天時(shí)，分別取 T1DM小鼠的脾臟（Spleen,SP）、皮膚引流淋巴結(jié)（Skin-draining lymph nodes,SLN）、腸系膜引流淋巴結(jié)（Mesenteric lymph node,MLN）和腸道固有層（Lamina propria,LP）組織，膠原酶消化制備單細(xì)胞懸液，進(jìn)行熒光抗體染色，采用流式細(xì)胞術(shù)技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測(cè)DC亞群變化情況，分析DC及其亞群占SP、SLN和LP總細(xì)胞的比例的變化，觀察CD4

3、+T細(xì)胞中FoxP3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Regulatory T cells,Treg)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.在STZ處理后第10天T1DM小鼠體內(nèi)SP和SLN的各DC亞群比例與正常對(duì)照組小鼠相比較沒有明顯變化。隨著發(fā)病時(shí)間的增加，在STZ處理后第30天和第60天時(shí) T1DM小鼠的SP體積明顯減小，SP中淋巴系樹突狀細(xì)胞（Lymphoid dendritic cell,LyDC）、髓系樹突狀細(xì)胞(Myeloid de

4、ndritic cell,MyDC)和漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞(Plasmacytoid dendritic Cell,pDC)的比例與正常對(duì)照組小鼠相比較明顯降低。
　　2.在STZ處理第30天T1DM小鼠體內(nèi)SLN的定居性樹突狀細(xì)胞（Resident DC）、遷移性樹突狀細(xì)胞（Migratory DC）和pDC的比例與正常對(duì)照組小鼠相比較明顯降低。
　　3．在STZ處理后第10天T1DM小鼠體內(nèi)LP的DC亞群比例與正常對(duì)照組小

5、鼠相比較明顯減少；雖然 LP總的DC亞群比例明顯降低，但是其CD103+CD11b-DC、CD103+CD11b+DC和CD103-CD11b+DC亞群的比例并沒有明顯變化。隨著發(fā)病時(shí)間的增加，在STZ處理后第30天和第60天T1DM小鼠小腸明顯變長(zhǎng)變粗，并存在著炎性浸潤(rùn)，DC比例明顯降低。
　　4．在STZ處理后第10天T1DM小鼠體內(nèi)SP、LP、SLN和MLN的CD4+T細(xì)胞中 FoxP3+Treg的表達(dá)與正常對(duì)照組小鼠相比較

6、沒有明顯區(qū)別。隨著發(fā)病時(shí)間的增加，在STZ處理后第30天和第60天T1DM小鼠體內(nèi)SLN、MLN的CD4+T細(xì)胞中FoxP3+Treg的表達(dá)比正常對(duì)照組明顯增加，而SP和LP的CD4+T細(xì)胞中FoxP3+Treg的表達(dá)與正常對(duì)照組并沒有明顯區(qū)別。
　　結(jié)論：
　　STZ誘導(dǎo)的小鼠T1DM體內(nèi)SP中LyDC、MyDC和pDC的比例降低，SLN中Resident DC、Migratory DC和pDC比例降低，LP中DC亞群的比