不同樹突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的CTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究.pdf_第1頁
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1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文不同樹突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的CTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究姓名:劉光輝申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):小兒外科指導(dǎo)教師:王家祥20060530鄭州大學(xué)2∞6屆碩士學(xué)位論文不同樹突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的cTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究腫瘤細(xì)胞全抗原是包含正??乖煞趾捅姸嗄[瘤相關(guān)抗原及腫瘤特異性抗原的成分復(fù)雜的混合物。在理論上,負(fù)載腫瘤全抗原的DC可誘導(dǎo)出針對各抗原成分的cTL克隆,而應(yīng)用經(jīng)自身抗原致敏的iIIlDc則可清除其中針對自身抗

2、原的cTL克隆。因而,聯(lián)合應(yīng)用免疫激活型Dc和致耐受型Dc有望解決使用全抗原時的自身免疫反應(yīng)問題。實驗?zāi)康呐囵B(yǎng)外周血來源單核細(xì)胞并誘導(dǎo)成為mDc和i【IlDc,分別負(fù)載人肝癌細(xì)胞株s刪c一7721和人胎肝細(xì)胞株L一02細(xì)胞凍融抗原(frozen—thawedantigen,F(xiàn)TA)。研究負(fù)載s~眥c一772l抗原的mDc和imDc分別誘導(dǎo)的cTL對人肝癌細(xì)胞株s咖c一7721、人食管癌細(xì)胞株Ec一109和人胃癌細(xì)胞株BGc一823細(xì)胞的

3、體外殺傷效應(yīng),以及負(fù)載s刪C一7721抗原的mDC和負(fù)載L一02抗原的imDc聯(lián)合誘導(dǎo)的cTL對s姍C(jī)一7721和L—02細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng),并探討聯(lián)合曲c和imDc制備Dc腫瘤疫苗以消除或減弱常規(guī)方法制備的Dc腫瘤疫苗所致自身免疫反應(yīng)的可能性。實驗方法1采用反復(fù)凍融法制備s棚爭7721及L_02細(xì)胞凍融抗原2Dc的分離、培養(yǎng)、抗原負(fù)載及T細(xì)胞的獲取Fic01l法分離外周血單個核細(xì)胞,貼壁法對其進(jìn)行純化,并收集淋巴細(xì)胞培養(yǎng)備用。單核細(xì)胞

4、在24孔板上用含lO%自體血清、GM_cSF10ng/m1、IL一410ng/m1培養(yǎng)基,37℃、5%c02孵箱培養(yǎng)并按以下分組:A:曲c,第7天加入s刪c一772l細(xì)胞抗原;B:iJllDc,第5天加入IL—lO10ng/ml,第7天加入s佃蟠C一772l細(xì)胞抗原:C:imDc組,第5天培養(yǎng)基中加入IL一1010ng/m1,第7天加入L—02細(xì)胞抗原(各組所加抗原均為O5mg/孔)。各組另設(shè)無抗原對照,并隔天半量換液,第9天收獲備用。

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