姜黃素和黃連素對膽汁酸誘導的人結(jié)腸癌細胞增生的抑制作用研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學碩士學位論文姜黃素和黃連素對膽汁酸誘導的人結(jié)腸癌細胞增生的抑制作用研究姓名：翟春穎申請學位級別：碩士專業(yè)：消化內(nèi)科指導教師：王邦茂20040401天津醫(yī)科大學碩上學付詒f姜黃素和黃連素對膽汁酸誘導的人結(jié)腸癌細胞增生的抑制作用研究中文摘要背景和目的：膽汁酸特別是次級膽汁酸中的脫氧膽酸( D c A ) 被認為是胃腸道的致癌因子而日益受到重視。姜黃素( c u R ) 和黃連素( B E R ) 是具有抗炎作用的中藥植物提取物，

2、近期研究發(fā)現(xiàn)它們還可能具有抗腫瘤活性。本實驗旨在觀察這兩種藥物對脫氧膽酸誘導的人結(jié)腸癌H T - 2 9 細胞增殖的抑制作用，探討其可能的抑癌作用機制。方法：在H T - 2 9 細胞中加入2 0 0 l - t M 脫氧膽酸來誘導癌細胞的增殖。分別加入不同濃度的姜黃素和黃連素，培養(yǎng)6 、1 2 、2 4 和4 8 小時。采用氮藍四唑鹽實驗( M T T ) 法測定這兩種藥物對細胞生長和增殖的影響；用R T - P C R法檢測不同濃度

3、姜黃素和黃連素對環(huán)氧合酶一2 ( C O X ．2 ) m R N A 的抑制作用：用免疫細胞化學染色技術(shù)鑒定細胞漿中C O X ．2 的表達：用放射免疫法檢測細胞培養(yǎng)液中前列腺素E 2 ( P G E 2 ) 的含量。結(jié)果：2 0 0 1 ．1 M D C A 可以促進H T - 2 9 細胞的增殖，并誘導C O X ·2 m R N A的轉(zhuǎn)錄、C O X 一2 蛋白的表達及P G E 2 的合成。姜黃素濃度為1 uM 時，

4、對H T - 2 9 細胞生長的抑制率為8 ．7 5 ％：姜黃素濃度> ／0 ．5 1 ．t M ，作用1 2 小時，對D C A 誘導的C O X 一2m R N A 轉(zhuǎn)錄有抑制作用；姜黃素濃度≥l “M ，作用時間在2 4 ．4 8 小時，可以抑制D C A 誘導的C O X - 2蛋白的表達和P G E 2 的合成； C O X - 2 表達的細胞陽性率與細胞培養(yǎng)液中P G E 2 的含量呈正相關(guān)：姜黃素的作用呈濃度一時間依