姜黃素衍生物抑制結腸癌細胞增殖侵襲作用.pdf

1、姜黃素是從天然植物姜黃中提取的一種酚類化合物，具有抗炎及抗氧化雙重作用。已有研究證實姜黃素通過抑制腫瘤血管生成對多種人類腫瘤具有抑制作用。然而姜黃素水溶性差、易水解、不穩(wěn)定，口服吸收后迅速被肝臟代謝，首過消除現(xiàn)象明顯致使其生物利用度低；而姜黃素的衍生物能有效提其高生物利用度，增強抗腫瘤效能。本研究探討姜黃素及其4種衍生物（T316、T62、T63、T6F4）對結腸癌細胞株Lovo和SW480增殖、遷移能力及誘導癌細胞凋亡能力的影響；并將

2、姜黃素和4種衍生物的抗結腸癌作用進行了比較。
　　目的：
　　研究姜黃素（Curcumin，Cur）及其4種衍生物（T316、T62、T63、T6F4）對結腸癌細胞株Lovo和SW480的毒性作用及增殖遷移能力的影響，并初步探討其作用機制。
　　方法：
　　（1）利用低濃度（0.125μmol/L～32μmol/L）的姜黃素及4種衍生物作用于人結腸癌細胞株Lovo和SW48048h后，通過四甲基偶氮唑鹽(MTT)

3、比色檢測姜黃素對這兩株腫瘤細胞生長抑制能力的影響；
　　（2）采用細胞劃痕實驗檢測姜黃素及4種衍生物對人類兩株結腸癌細胞24小時內遷移作用的影響；
　　（3）利用軟瓊脂克隆實驗檢測姜黃素及4種衍生物對人類兩株結腸癌細胞克隆增殖能力的影響；
　?。?）PI單染流式細胞技術檢測姜黃素及其4種衍生物對結腸癌細胞凋亡能力的影響；
　?。?）熒光素酶報告基因檢測姜黃素及其4種衍生物對TNF-α誘導下結腸癌細胞內核轉錄因子（

4、NF-κB）信號通路的影響。
　　結果：
　　0.125μmol/L～32μmol/L濃度范圍內Cur對Lovo株和SW480株細胞的生長抑制率隨藥物的濃度升高而增大，呈劑量依賴關系；0.125μmol/L～10μmol/L濃度范圍內T316、T62、T63、T6F4對Lovo株和SW480株細胞的生長抑制率尚呈劑量依賴關系，但10μmol/L之后增大藥物的濃度，細胞生長抑制率變化不明顯；姜黃素對Lovo和SW480的半數(shù)抑

5、制濃度（IC50）分別是14.22±0.20μmol/L和10.56±0.70μmol/L，高于4種衍生物對兩株細胞IC50的6～8倍（P<0.01）；根據(jù)MTT試驗我們選用0.5μmol/L這一藥物濃度進行下面的試驗。對照組兩株細胞24小時遷移距離分別為160.7±18.4μm、389.9±8.9μm，Lovo細胞各實驗組24小時的遷移距離在56.7±5.4μm～102.9±10.0μm之間，SW480細胞各實驗組24小時的遷移距離在

6、80.4±9.6μm～159.9±18.8μm之間，但四種衍生物組細胞遷移的距離均小于對照組細胞遷移距離的三分之一（P<0.05）。對照組兩株細胞的克隆數(shù)分別為60±8個和75±5個，Lovo細胞各實驗組克隆數(shù)在24±3個～55±3個之間，SW480細胞各實驗組克隆數(shù)在34±4個～64±6個之間，但四種衍生物組癌細胞的克隆數(shù)均少于對照組克隆數(shù)的二分之一（P<0.05）。檢測各組細胞凋亡率分別為56.67±1.88％、31.83±0.85

7、%、26.01±0.44%、21.44±3.01%、10.05±0.54%，姜黃素及4種衍生物誘導Lovo株細胞的凋亡率均高于對照組細胞的凋亡率（6.81±0.23%）（P<0.05）。熒光素酶報告基因試驗中我們發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子（TNF-α）能明顯增強細胞內NF-κB的表達活性；而濃度為0.5μmol/L的T316、T62、T63、T6F4、Cur能顯著下調細胞內TNF-α誘導下的NF-κB的表達活性。
　　結論：
　　姜黃