精氨酸酶在蛛網(wǎng)膜下腔出血后所致腦血管痙攣中作用的研究.pdf

1、目的:
　　前期腦血管蛋白組學(xué)研究表明，精氨酸酶（Arginase）是蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管中35種高表達(dá)的差異蛋白之一。Arginase與重要的血管活性物質(zhì)NO間關(guān)系密切，我們推測(cè)Arginase可能在SAH后腦血管痙攣(CVS)的病理過(guò)程中發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)研究Arginase在SAH后CVS中的表達(dá)變化，并觀察應(yīng)用其抑制劑對(duì)SAH后CVS的作用，為防治CVS尋找新的途徑。
　　方法:
　　1.建立兔二次蛛

2、網(wǎng)膜下腔出血模型（CVS模型）:按照不同時(shí)相分組，在建立模型前及建立模型后的3d、5d、7d、14d行DSA造影，比較各時(shí)相基底動(dòng)脈直徑的變化。
　　2.Western blotting檢測(cè)正常組及建立模型后基底動(dòng)脈Arginase蛋白表達(dá)的變化:正常兔及在建立模型3d、5d、7d、14d后，Western blotting分別測(cè)定蛋白表達(dá)水平，并分析建立模型后不同時(shí)相基底動(dòng)脈直徑的變化與Arginase不同時(shí)相表達(dá)的變化是否有相

3、關(guān)性。
　　3.處理組實(shí)驗(yàn):分正常組、SAH組、Arginase抑制劑組、溶媒組4組。建立二次蛛網(wǎng)膜下腔出血模型后30min經(jīng)腦池途徑分別行藥物、生理鹽水及溶媒處理。在建立模型前及建立模型后7d分別行DSA造影，比較前后兩次造影基底動(dòng)脈直徑的變化，及Western blotting測(cè)定Arginase蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1.建立兔二次SAH后CVS模型。DSA造影顯示與正常相比，注血后3d、5d、7d

4、、14d均出現(xiàn)不同程度的血管狹窄，分別為正常的76.0％±8.0％(P＜0.01)、78.2％±10.4％(P＜0.01)、66.7％±12.8％(P＜0.01)、84.7％±8.6％(P＜0.05),7d時(shí)達(dá)高峰，14d時(shí)較前緩解。
　　2.Arginase蛋白表達(dá)在建立模型后3d、5d、7d、14d均升高，分別為80.6±4.1％、86.2±6.7％、88.4±7.1％、36.5±9.9％，與正常組對(duì)比(P＜0.05)，其中7

5、d時(shí)為高峰。Arginase表達(dá)的時(shí)相性變化與建立腦血管痙攣模型后基底動(dòng)脈直徑的時(shí)相性變化的相關(guān)系數(shù)為0.956，二者的時(shí)相性變化存在直線關(guān)系。
　　3.處理組實(shí)驗(yàn):Arginase抑制劑處理組的基底動(dòng)脈直徑與第0天相比顯示無(wú)顯著差別（93.2％±6.4％，與SAH組比較P＜0.01）;溶媒組的基底動(dòng)脈直徑與第0天相比顯示狹窄（66.7％±11.8％，與正常組比較P＜0.05）;溶媒處理組上述指標(biāo)與SAH組無(wú)明顯差異。Argina

6、se抑制劑組的Arginase蛋白表達(dá)處于低水平，與SAH組比較顯著降低（24.7％±5.4％，P＜0.01）;溶媒組的Arginase蛋白表達(dá)呈高水平，與SAH組比較無(wú)顯著變化（63.1％±13.6％，P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.結(jié)果提示Arginase參與了SAH后CVS的發(fā)生發(fā)展;
　　2.特異性抑制Arginase的表達(dá)，能有效緩解SAH后腦血管痙攣;
　　3.Arginase可能是治療腦血管痙