
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:將SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine)與亞慢性氟中毒導(dǎo)致的人體軟骨細(xì)胞改變作為研究重點(diǎn),研究亞慢性氟中毒對(duì)人體軟骨細(xì)胞中SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine)表達(dá)的影響,在分子水平深化對(duì)于亞慢性氟中毒軟骨病變發(fā)生機(jī)理的認(rèn)識(shí),為進(jìn)一步研究亞慢性氟中毒軟骨損害發(fā)病機(jī)制提供新線索。
方法:隨機(jī)收集在
2、貴陽醫(yī)學(xué)院在院手術(shù),有完整臨床病歷資料的患者病例,嚴(yán)格無菌手術(shù)下,取出的關(guān)節(jié)軟骨(帶骨取材)標(biāo)本共40例,其中實(shí)驗(yàn)組為臨床證實(shí)氟骨癥標(biāo)本30例,正常組10例。肉眼觀察所取關(guān)節(jié)軟骨色澤及外形,PBS溶液沖洗,置于4%多聚甲醛固定液中固定。尿液中的氟離子含量采用氟離子選擇電極法測(cè)定;骨組織中氟離子含量測(cè)定采用高溫燃燒水解氟離子選擇電極法測(cè)定;關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)本中的SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in
3、Cysteine)含量采用免疫組化染色實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)及顯微圖像光密度值分析測(cè)定。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)本經(jīng)過固定、脫鈣、脫水、石蠟包埋、組織切片、制片等處理后進(jìn)行免疫組化染色、HE染色以及硝酸銀染色,在光學(xué)顯微鏡下拍照并且進(jìn)行實(shí)驗(yàn)采圖及顯微圖像分析。本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,并以SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析處理,檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α=0.05。
結(jié)果:與對(duì)照組比較,亞慢性氟中毒實(shí)驗(yàn)組尿氟離子含量水平明顯增高
4、(p<0.05)、骨組織中氟離子含量較正常對(duì)照組明顯增高(p<0.05)、軟骨細(xì)胞形態(tài)改變程度與正常對(duì)照組相比較明顯、軟骨細(xì)胞中 SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine)水平顯著升高,顯微圖像光密度分析顯示實(shí)驗(yàn)組陽性結(jié)果光密度分析值與對(duì)照組的光密度值有顯著差異(p<0.05)。說明亞慢性氟中毒氟暴露對(duì)人體軟骨細(xì)胞中SPARC的含量表達(dá)有一定的影響,值得進(jìn)一步深入研究。
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