超聲微泡促進骨髓間質細胞跨血腦屏障遷移的實驗研究.pdf

1、缺血性中風是致死、致殘的主要病因之一。腦損傷很容易遺留永久性神經(jīng)功能缺失,其原因體現(xiàn)在腦組織對自身的損傷修復能力不強,同時采用藥物治療效果不佳。研究學者通過動物實驗以及臨床實驗證明:移植胚胎神經(jīng)細胞和多能干細胞可促進損傷腦組織的修復,改善神經(jīng)功能缺失癥狀,提示細胞移植方法是治療缺血腦損傷的很有希望的途徑。大量實驗研究表明,骨髓間質細胞(bone marrow stromal cells, BMSC)是最有潛力的一種修復細胞,其在腦內移植

2、后,能夠存活下來,并不斷遷移和分化,而后在一定程度上修復腦梗死后神經(jīng)功能的障礙。移植細胞促進腦損傷修復的機制包括替代壞死細胞功能、抑制局部瘢痕形成和促進損傷局部神經(jīng)再生等,而移植細胞向腦損傷局部的遷移是促進腦損傷修復的前提。因此,探討促進移植細胞向腦損傷局部遷移的措施有非常重要的實際意義。
　　血腦屏障影響經(jīng)靜脈移植細胞向腦損傷局部的遷移,降低移植治療效果。近年研究發(fā)現(xiàn),超聲聯(lián)合微泡技術可安全、有效地暫時性開放血腦屏障,促進治療藥

3、物通過血腦屏障,提高腦實質內藥物濃度,達到提高治療效果的目的。但目前尚未見到超聲聯(lián)合微泡技術對移植細胞向腦內遷移影響的研究報道。因此,深入探討超聲聯(lián)合微泡技術促進經(jīng)靜脈移植骨髓間質細胞向腦內遷移的可能性及其機制,有望為缺血性中風帶來新的治療途徑。
　　研究內容:(1)評價大鼠前腦缺血/再灌注模型血腦屏障完整性:光鏡和電鏡下觀察模型動物血腦屏障完整性:包括腦血管內皮細胞緊密連接、基底膜和星形膠質細胞偽足完整性;觀察血腦屏障結構蛋白表

4、達:包括腦血管內皮細胞;閉合蛋白 claudin-5基底膜;IV膠原、層連蛋白星型膠質細胞突起;S100B蛋白等;評價血腦屏障功能:光鏡觀察伊文思藍滲出量,電鏡下觀察硝酸鑭染色。(2)觀察超聲聯(lián)合微泡技術對前腦缺血/再灌注大鼠血腦屏障通透性的影響:(3)觀察超聲聯(lián)合微泡技術能否影響經(jīng)靜脈移植的骨髓間質細胞向缺血性腦損傷區(qū)遷移的活動:觀察體外擴增和鑒定骨髓間質細胞;觀察經(jīng)靜脈注射移植骨髓間質細胞;不比較骨髓間質細胞向腦缺血損傷區(qū)遷移的數(shù)量

5、和距離;觀察AchE陽性纖維密度。(4)觀察超聲聯(lián)合微泡技術對經(jīng)靜脈移植的骨髓間質細胞對大鼠神經(jīng)功能的影響:水迷宮試驗觀察空間學習、記憶能力。
　　研究結果:(1)缺血再灌注模型可以在一定程度上增加血腦屏障通透性。(2)超聲微泡可以開放腦缺血/再灌注血腦屏障。(3)超聲微泡可以有效開放 BBB,并促進 MSCS向腦內遷移和AchE陽性纖維增多。(4)超聲微泡聯(lián)合MSCs移植可以促進前腦缺血大鼠空間學習和記憶能力。
　　研究結