新型聚乙二醇胰島素的體內(nèi)過程和安全性研究.pdf

1、目的:
　　聚乙二醇（PEG）修飾技術(shù)是現(xiàn)今國際上蛋白藥物二次開發(fā)的熱點(diǎn)技術(shù)。本項(xiàng)目研究重組人胰島素（Det）的PEG修飾物新型聚乙二醇胰島素（PEG-Det）的體內(nèi)代謝過程及安全性，以期闡明PEG修飾技術(shù)使蛋白藥物發(fā)揮長(zhǎng)效作用及具有良好安全性的合理性和科學(xué)性。
　　方法;
　　本研究基于生物技術(shù)藥物的特點(diǎn)，建立并采用放射免疫（RIA）和酶聯(lián)免疫（ELISA）的分析方法，研究Det/PEG-Det的Beagle犬藥代動(dòng)

2、力學(xué)/藥效動(dòng)力學(xué)特征，研究PEG修飾對(duì)Det體內(nèi)過程的影響；研究PEG-Det的Beagle犬毒代動(dòng)力學(xué)/毒效動(dòng)力學(xué)特征、免疫原性、免疫毒性、制劑安全性，綜合評(píng)價(jià)PEG修飾對(duì)Det安全性的影響。
　　結(jié)果:
　?。?）藥物體內(nèi)過程研究結(jié)果表明：①與非PEG修飾的Det相比，PEG-Det在Beagle犬體內(nèi)平均消除半衰期t1/2?延長(zhǎng)59倍；清除率CL降低35倍；達(dá)峰時(shí)間Tmax增加9倍。② Beagle犬單次皮下注射（s.

3、c.）PEG-Det（25、50和100μg/kg）后，峰濃度Cmax和藥時(shí)曲線下面積AUC、Tmax隨劑量增加呈更大比例增大，CL隨劑量增大而降低；t1/2β與劑量呈非相關(guān)。③ Beagle犬多次s.c. PEG-Det（50μg/kg）后，體內(nèi)無蓄積。④ Beagle犬多次s.c. PEG-Det（37.5、75和150μg/kg）在毒性劑量暴露下，血藥濃度升高的同時(shí)伴隨著血糖的降低，隨著血藥濃度的降低，血糖水平也逐漸升高，藥后12

4、h基本恢復(fù)到給藥前的血糖基礎(chǔ)水平，Cmax和AUC隨劑量的增加而增大，體內(nèi)無蓄積。
　?。?）藥物安全性研究結(jié)果表明：① Beagle犬血清中抗PEG-Det抗體為PEG修飾劑中單甲氧基結(jié)構(gòu)產(chǎn)生，與Det蛋白無關(guān)；② PEG-Det對(duì)免疫系統(tǒng)補(bǔ)體C3、C4及免疫復(fù)合物CIC水平無明顯影響，對(duì)白細(xì)胞總數(shù)及分類計(jì)數(shù)、免疫組織器官未產(chǎn)生明顯毒性；③ PEG-Det s.c.或靜脈注射（i.v.）給藥時(shí)，對(duì)注射部位皮膚及肌肉或血管均無刺激