多年生簇毛麥著絲粒重復序列的分離與鑒定.pdf

1、簇毛麥屬Dasypyrum(也稱Haynaldia)是小麥的重要近緣屬之一，它包括2個物種，即分布于地中海和西南亞的二倍體簇毛麥（D. villosum，基因組為VV）和分布于北非的四倍體多年生簇毛麥（D. breviaristatum，基因組為VbVbVbVb）。簇毛麥屬物種具有多種優(yōu)良性狀是栽培小麥所需要的，如具有抗白粉病、抗稈銹和葉銹病、抗全蝕病、耐寒耐旱和蛋白質(zhì)含量高等，可以作為小麥抗病、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)育種的重要遺傳資源。
　

2、　通過PCR擴增，我們從多年生簇毛麥中分離得到兩個片段大小分別為920bp和1003bp的重復序列，分別命名為pDvC1和pDvC2。通過BLAST序列比對發(fā)現(xiàn)，pDvC1和pDvC2與Ty3-gypsy型反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的外殼蛋白編碼基因序列有高度的同源性。以pDvC1和pDvC2序列做為探針，我們利用熒光原位雜交分析了它們在小麥族多種物種的染色體中的分布情況。原位雜交結(jié)果顯示，pDvC1和pDvC2在多年生簇毛麥染色體的著絲粒區(qū)域上有強

3、烈的雜交信號。用它們雜交硬粒小麥-二倍體簇毛麥雙二倍體（AABBVV），結(jié)果顯示在所有染色體的著絲點區(qū)域均有信號出現(xiàn)，但是，在小麥染色體著絲粒附近區(qū)域的熒光信號強度明顯弱于簇毛麥染色體著絲粒附近區(qū)域的信號。這說明了Ty3-gypsy型反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子在簇毛麥物種的著絲粒區(qū)域有明顯的擴增。而且我們對中間偃麥草（ Thinopyrum intermedium）進行原位雜交，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在中間偃麥草中有6條染色體的著絲點有顯著擴增，這也與我們以前認為